分光光度法是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的試驗(yàn)方法,。分光光度計(jì)是基于分光光度法,,通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器,。
日立紫外分光光度計(jì)UH4150
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紫外-可見分光光度計(jì)的類型很多,,根據(jù)儀器結(jié)構(gòu)可分為單光束分光光度計(jì),、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)三種,,其中單光束分光光度計(jì)和雙光束分光光度計(jì)屬于單波長(zhǎng)分光光度計(jì),。
1.單光束分光光度計(jì) 從光源發(fā)出的光經(jīng)單色器分光后得到一束單色光,,通過吸收池后,最后照射在檢測(cè)器上始終為一束光,,如下圖所示,。該類型的分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜,,但由于其雜散光,、光源波動(dòng)等影響很大,所以準(zhǔn)確度較差,。
單光束分光光度計(jì)工作流程示意圖
2.雙光束分光光度計(jì) 從光源發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)單色器分光后的單色光被反射鏡(切光器)分為強(qiáng)度相等的兩束光,,分別通過參比溶液和樣品溶液,如下圖所示,。由于兩束光同時(shí)通過參比溶液和樣品溶液,,因此能夠自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差,。雙光束分光光度計(jì)一般能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線,其靈敏度較好,,但結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,、價(jià)格較貴。
日立雙光束分光光度計(jì)U-2900/2910
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雙光束分光光度計(jì)工作流程示意圖
3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì) 由同一光源發(fā)出的光被分成兩束,,分別經(jīng)過兩個(gè)單色器,,得到兩束不同波長(zhǎng)的單色光,再利用切光器使兩束不同波長(zhǎng)的單色光以一定頻率交替照射同一溶液,,然后再經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng),,經(jīng)過信息處理最后得到兩波長(zhǎng)處的吸光度的差值,如圖3-11所示,。雙波長(zhǎng)分光光度法一定程度地消除了背景干擾及共存組分的干擾,,提高了分析的靈敏度。雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)不僅可用于多組分混合試樣的分析,,還可以用于一般分光光度計(jì)不能測(cè)定的渾濁試樣(如生物組織液)的分析,。
雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)光路示意圖
紫外分光光度計(jì)選型時(shí),首先確定實(shí)驗(yàn)是定性分析還是定量分析,,同時(shí)被測(cè)樣品的狀態(tài)(液體,、氣體、固體)也應(yīng)在考慮范圍內(nèi),。當(dāng)然,,最主要的決定因素是不同型號(hào)之間的價(jià)格差異,在預(yù)算充足的情況下,,選擇靈敏度好的分光光度計(jì),,一定會(huì)給實(shí)驗(yàn)分析帶來事半功倍的效果。蘇州思普萊代理的日立分光光度計(jì),,整機(jī)日本進(jìn)口,,配置多種類測(cè)量附件,是科研院校的分光光度計(jì)品牌,。
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