日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢(xún)

人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞細(xì)胞(SK-N-MC)培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)

來(lái)源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2021年04月08日 18:00  

人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞細(xì)胞(SK-N-MC)培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)

 

細(xì)胞介紹

這株細(xì)胞與HTB-11都是神經(jīng)源的,。19719月分離得到SK-N-MC后,,發(fā)現(xiàn)它有中性多巴胺-β-羥化酶活性,,也有細(xì)胞內(nèi)兒茶酚胺,,用甲醛可以誘導(dǎo)出熒光,。

 

細(xì)胞特性

1) 來(lái)源:腦,;眼眶上區(qū)神經(jīng)上皮瘤轉(zhuǎn)移灶

2) 形態(tài)上皮細(xì)胞

3) 含量:>1x106 個(gè)/mL

4) 污染:支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5) 規(guī)格:T75或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞,。收到細(xì)胞后,1000RPM,,常溫條件,,離心5min潔凈操作臺(tái)棄去上清,,加入推薦使用的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),,傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存,。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。

 

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

                       

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。

2) 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3) 凍存液90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)液氮儲(chǔ)存,。

二. 細(xì)胞處理

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或將細(xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2,。

2. 2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA培養(yǎng)瓶中,,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3)細(xì)胞凍存:細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO進(jìn)行凍存,。

 

注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系

2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為潛在的生物危害性,,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

蛋白雙向(2-D)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙?;?/a>

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測(cè)

動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開(kāi)通此功能
詳詢(xún)客服 : 0571-87858618