全血/組織/細(xì)胞基因組DNA快速提取試劑盒

Rapid Genomic DNA Kit

產(chǎn)品信息：

保存條件：本試劑盒在室溫儲存 12 個月不影響使用效果。RnaseA,、蛋白酶 K 可室溫運(yùn)輸，建議-20℃長期保存。

 產(chǎn)品介紹：

*的結(jié)合液/蛋白酶 K 迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,，然后基因組DNA 在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,，抑制物去除液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除，后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫,。

 產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.重復(fù)性好:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜,，柱與柱之間吸附量差異極小?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。

2 提取純度高，OD₂₆₀/OD₂₈₀ 典型的比值達(dá)1.7～1.9,，可直接用于PCR,，Southern-blot

和各種酶切反應(yīng)。

3. 簡單快速,，一小時內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA

4. 廣 泛：適用于血液,、多種動物細(xì)胞和動物組織等。

 注意事項(xiàng)：

1. 結(jié)合液CB 或者抑制物去除液IR低溫時可能出現(xiàn)析出和沉淀,，可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解,，恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用,。

2. 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化,、pH 值變化,。

3. 結(jié)合液CB和抑制物去除液IR 中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套,，避免沾染皮膚,，眼睛和衣服。若沾染皮膚,、眼睛時,，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。

4. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA,，不影響下游酶切,、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫,， 但應(yīng)該確保批pH 大于7.5,，pH 過低影響洗脫效率。用水洗脫DNA 應(yīng)該保存在-20℃,。DNA 如果需要長期保存,，可以用 TE 緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA,，pH 8.0）,，但是EDTA 可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時可以適當(dāng)稀釋,。

 自備試劑：無水乙醇

 操作步驟：

提示：第-次使用前請先在漂洗液WB 中加入指-*定量無水乙醇,，充分混勻，加入后請及時在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇,，以免多次加入!

1. 處理材料

a. 血液

如提取材料為血液,，可直接使用220μl新鮮、冷凍或加入各種抗凝劑的血液,，不足220µl用緩沖液BB補(bǔ)足220µl，振蕩混勻,。

注意：如需處理更大體積血液,，如300μl-1ml，應(yīng)按以下步驟操作：在樣品中加入 3 倍體積紅細(xì)胞裂解液（例如,，300μl血液加入900μl紅細(xì)胞裂解液）,，顛倒混勻，室溫放置5 min,，期間再顛倒混勻幾次,。10000rpm離心1 min（若離心機(jī)-*高轉(zhuǎn)速不允許，也可3000rpm離心5 min，吸去上清,，留下白細(xì)胞沉淀,，加220μl緩沖液BB，振蕩至*混勻,。紅細(xì)胞裂解液本公司另外有售,，可根據(jù)需要來決定購買。

b.  如果處理血樣為禽類,、鳥類,、兩棲類或更低級生物的抗凝血液，其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,，因此處理量 5-20μl,，可加緩沖液 BB 補(bǔ)足 220μl 后進(jìn)行下面的裂解步驟。

注意：不同組織裂解時間不同，通常需1-3 h即可完成（鼠尾需要消化過夜）,。不會影響 后續(xù)操作,。每小時顛倒混合樣品2-3次，用水浴振蕩器也可

5.加入結(jié)合液CB并充分混勻后,，置于70℃水浴10 min,，等溶液變清亮，12,000rpm短離心以去 除管蓋內(nèi)壁的水珠,。

注意：加入緩沖液GB時可能會產(chǎn)生白色沉淀,，一般70℃放置時會消失，不會影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),。如溶液未變清亮,，說明細(xì)胞裂解不*，可能導(dǎo)致提取DNA量少和提取出的DNA 不純,。當(dāng)血液體積≤200μl且沒有采用紅細(xì)胞裂解處理,，或是樣本儲存條件不佳，水浴后顏 色可能為深褐色,，注意溶液中沒有團(tuán)塊等沉淀

6.加入220µl的無水乙醇,，充分振蕩混勻15 sec，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,，簡短離心以去 除管蓋內(nèi)壁的水珠,。

7.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）,，12,000rpm 離心30 sec,，倒掉廢液，將吸附柱AC放回收集管中,。

8.加入500µl抑制物去除劑IR,，12,000rpm離心1 min。倒掉收集管中的濾液,。并將離心柱放回收集管中,。

9.加入500µl 漂洗液WB，12,000rpm離心30 sec,。（使用前請檢查是否已經(jīng)加入無水乙醇）倒掉收集管中的濾液。并將離心柱放回收集管中,。

10. 重復(fù)步驟9的操作,。

11. 將吸附柱AC柱放回收集管中,，12,000rpm離心2 min，倒掉廢液,。將AC吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘,，以*晾干吸附材料中殘余的漂洗液。