ELASA檢測方法一

來源：上海劍鈍生物科技有限公司 2020年12月31日 16:14

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。

2.次日洗滌3次。

3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。(同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,后一遍用DDW洗滌。

4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘,。

5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上,，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。

以上是ELSIA間接法簡單介紹,，若有不足，歡迎補(bǔ)充,。

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