多肽標記和修飾
目前多肽標記及修飾的內(nèi)容非常多,，廣泛應用在多肽藥物，多肽生物學,，多肽抗體以及多肽試劑的研究中,。目前應用廣泛的有：非放射性核素標記（C13，H2,，N15）,，熒光標記（FAM，F(xiàn)ITC等）,，生物素標記,，磷酸化修飾等。
1. 非放射性核素標記
目前在非放射性核素標記中,，使用廣泛的仍然是C13,，H2，因為其使用安全,，放射性小?，F(xiàn)在有比較*的非放射性標記的氨基酸，可以按照正常的多肽合成方法將標記好的氨基酸直接連接到多肽上,。
2. 熒光標記
熒光標記由于沒有放射性,，實驗操作簡單。因此,，目前在生物學研究中熒光標記應用非常廣泛,，熒光標記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關系，對于有游離羧基的采用的方法與接肽反應相同,，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接,。 在N端標記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素,，通常會伴有后一個氨基酸的去除，但當有一個間隔器如氨基己酸,，或者是通過非酸性環(huán)境將目的肽從樹脂上切下來時,，這種情況可避免。
3.生物素標記
生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system,，BAS),，是70年代后期應用于免疫學，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應放大系統(tǒng),。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應,，并與熒光素、酶,、同位素等免疫標記技術有機地結(jié)合,，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。主要有用于標記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP),，其中以BNHS,，當然，也可以直接使用生物素也可以標記,，因為其結(jié)構(gòu)上有個游離的羧基,，采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合，由于生物素的溶解度低,，使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度,。
4. 磷酸肽合成
磷酸肽在生命過程中發(fā)揮重要作用，磷酸化的位置在多肽上的Ser,，Thr,，Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,，目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸,。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法，但是目前采用該方法合成磷酸化也有缺點,，特別是在合成多磷酸化多肽或長肽的時候,，連接效率低，后產(chǎn)品純度很低,，對于這種磷酸化多肽,，我們考慮采用后磷酸化方法，其合成過程就是在多肽合成結(jié)束后,，選擇性脫去要標記的氨基酸的側(cè)鏈保護基,，對于Tyr,，Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護的氨基酸進行反應,，而Ser可以采用Fmoc-Ser（trt）,，在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化,，采用雙芐基亞磷酰胺,，四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基上,，隨后在過氧酸下氧化生成磷?；瓿煞磻?。
常用修飾和標記
N端標記或修飾
N端乙?；ˋC）
N端生物素標記（Biotin）
N端脂肪酸修飾(Pal, Myr)
N端羅丹明標記(Rodamine B)
N-FITC
N-5-FAM
N-BODIPY FL
N-Merocyanine 540
HYNIC
C端標記或修飾
C端酰胺化
C-端生物素標記 (用賴氨酸側(cè)鏈連接)
C-FITC (用賴氨酸側(cè)鏈連接)
C-AMC
C-AFC
磷酸化標記
p-Tyr
p-Ser
p-Thr
環(huán)化
二硫鍵環(huán)肽（S-S）
多肽首尾酰胺環(huán)
多肽蛋白偶聯(lián)
KLH偶聯(lián)
BSA偶聯(lián)
含特殊氨基酸
D-amino acids
Cit,Aib,Abu,Ahx
Lys(Ac)
Lys(Me), Lys(Me2), Lys(Me3)
MAP 復合抗原肽
MAP4 4分支
MAP8 8分支
MAP16 16分支

國肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制,、同位素標記肽,、人工胰島素、磷酸肽,、生物素標記肽,、熒光標記肽（Cy3、Cy5,、Fitc,、AMC等）、目錄肽,、偶聯(lián)蛋白（KLH,、BSA、OVA等）,、美容肽,、化妝品肽、多肽文庫構(gòu)建,、抗體服務,、糖肽、訂書肽,、藥物肽,、RGD環(huán)肽等。詳情請咨詢國肽生物