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多肽序列選擇

來源:合肥國肽生物科技有限公司   2020年08月04日 14:30  

多肽序列
1,、序列中包含過多的疏水性氨基酸
一般來講序列中有50%的疏水性氨基酸可大概判斷為較難溶序列(較短的序列除外),,更多的疏水性氨基酸不利于合成的粗品純度提高,對(duì)于純化的溶解制備都是較大的困難,,一般需在純度上溝通好,。
2、重復(fù)序列
重復(fù)序列會(huì)造成合成困難,,容易形成性質(zhì)相近的殘肽,從而在純化時(shí)較難分離,。
3,、未知修飾
對(duì)于特殊修飾、客戶提供特殊小分子等,,即便是合成方法的理論可行,,不代表實(shí)驗(yàn)一定成功,確定時(shí)需多做考慮,,將可能問題體現(xiàn)講清楚,,避免不必要的糾紛。
4,、長肽
所有的合成反應(yīng),,效率都不能達(dá)到的100%,,序列越長,產(chǎn)生的副反應(yīng)和雜質(zhì)也越多,,正確率,、收率都會(huì)大大降低,目前我們公司在長肽的合成積累了大量的經(jīng)驗(yàn),,理論上盡量不要超過60aa長度,,超過80aa長度的,考慮到合成難度,、成本等,,一般還是采用生物合成。
5,、磷酸化修飾
根據(jù)合成經(jīng)驗(yàn),,3或4個(gè)的磷酸化修飾位點(diǎn)合成難度大大增加,更多的磷酸化成功率較低,,一般只能做小量合成,,合成周期、價(jià)格也會(huì)大幅提升,,另外磷酸化修飾的位點(diǎn)不宜相近或相連,,靠近序列的N端對(duì)降低合成難度有利。
6,、多對(duì)二硫鍵成環(huán)
二硫鍵的環(huán)化會(huì)降低序列的溶解性,,對(duì)于客戶要求多對(duì)(3-4對(duì))二硫鍵成環(huán)的序列多為天然序列,非天然序列會(huì)存在配對(duì)錯(cuò)誤的可能,,此為環(huán)化過程的難點(diǎn),,另外多對(duì)二硫鍵收率都較低,合成時(shí)間跟價(jià)格也會(huì)大幅提升,。
7,、首尾酰胺環(huán)
序列中氨基酸組合對(duì)首尾酰胺環(huán)的成功率影響較大,含Asp和Glu的序列可選擇固相環(huán)化,,成功率較高,,對(duì)于液相首尾酰胺環(huán),序列中含D型氨基酸有利于成環(huán),。
8,、二肽或三肽的合成
短肽的合成往往收率較低,合成的困難在于裂解后,,粗肽無法經(jīng)析出,,純化的困難在于含95%TFA的裂解液不能直接應(yīng)用于制備,另外短肽極性較大,,較難吸附制備柱,,造成合成和純化的困難,。

國肽生物提供150個(gè)氨基酸以內(nèi)的長肽合成服務(wù)。
多肽合成過程中,,肽鏈過長時(shí),,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)缺殘基,氨基酸縮合困難等情況,,基于這些現(xiàn)象,,我們開發(fā)了三種有效提高反應(yīng)成功率的方案:
1. 微波合成法:對(duì)于合成過程中出現(xiàn)的一些難以縮合的氨基酸,我們采用微波法進(jìn)行合成,,該方法*,,并且大大縮短了反應(yīng)時(shí)間。
2. 片段合成法:當(dāng)某些多肽用常規(guī)合成方法合成困難,,我們也會(huì)采用將多肽中某一段的某幾個(gè)氨基酸縮合之后作為一個(gè)整體縮合到肽鏈上去,,這種方法也能夠解決許多合成中存在的問題。
3.酰肼合成法:酰肼法合成多肽的方法是將固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之間的化學(xué)選擇性反應(yīng)形成酰胺鍵而實(shí)現(xiàn)多肽的連接,,該方法根據(jù)肽鏈中Cys的位置,,將整條肽鏈分成多條序列分別合成,終經(jīng)過液相縮合反應(yīng)得到目標(biāo)肽,,顯著地提高了終產(chǎn)物純度,,廣泛適用于含有Cys的長鏈多肽的合成。
國肽生物擁有成熟的長肽合成工藝,,能夠根據(jù)客戶定制的多肽序列,,快速有效地設(shè)計(jì)合成方案并迅速開始合成,更快更好的為客戶提供所需的服務(wù)是我們不變的堅(jiān)持,。

國肽生物主要提供:多肽合成,、多肽定制、同位素標(biāo)記肽,、人工胰島素,、磷酸肽、生物素標(biāo)記肽,、熒光標(biāo)記肽(Cy3,、Cy5、Fitc,、AMC等)、目錄肽,、偶聯(lián)蛋白(KLH,、BSA、OVA等),、美容肽,、化妝品肽,、多肽文庫構(gòu)建、抗體服務(wù),、糖肽,、訂書肽、藥物肽,、RGD環(huán)肽等,。詳情請(qǐng)咨詢國肽生物

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