農(nóng)殘速測儀檢測原理及操作步驟

【檢測原理】

有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶的活性具有抑制作用,，通過測定該酶的活性被抑制的程度即可知樣品中含有農(nóng)藥的殘留情況,。

計(jì)算公式：抑制率(%)=(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0×100%

【檢測對象】

糧食,、蔬菜,、水果,、肉,、蛋,、奶,、水產(chǎn)品等

【技術(shù)指標(biāo)】

檢測下限：1% (抑制率)

檢測范圍：0-100% (抑制率)

【生產(chǎn)日期/保質(zhì)期】

生產(chǎn)日期：見外包裝,；保質(zhì)期：6個(gè)月

【試劑配制】

緩沖液：將緩沖液試劑袋中的試劑倒出，溶于500ml純凈水中,，溶解,、攪拌混勻即可。

②試劑A（膽堿酯酶）：往標(biāo)注為膽堿酯酶試劑瓶中加入適量緩沖液配成溶液,，搖勻后可直接使用（按照瓶簽上規(guī)定的用量加緩沖液）,。

③試劑B（顯色劑）：往標(biāo)注顯色劑試劑中加入9ml緩沖液,，搖勻即可。

④底物：往標(biāo)注為底物瓶中加入9ml純凈水,，搖勻即可,。

【操作步驟】

1.樣品前處理：

(1) ①植株：稱取5g樣品（葉菜剪成寬度為1厘米的菜樣，塊根菜取1厘米左右的表皮樣品）放入三角瓶中,，加入10ml緩沖液后,，振蕩提取2分鐘；

②茶葉：稱取0.5g茶葉樣品,，加入5ml丙酮,，振蕩提取5分鐘；取0.2ml上述丙酮溶液,，40~50℃水浴蒸干,；加入2.5ml緩沖液，振蕩2分鐘,；（自備丙酮）

(2) 若浸提液清澈無色或顏色較淺,，取上清液待測；

若浸提液混濁,，離心,，取上清液待測；

若浸提液色素干擾嚴(yán)重,，可用活性炭脫色,，具體方法如下：

將浸提液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)三角瓶中，加入0.1~0.5g活性碳(根據(jù)顏色深淺調(diào)整),，水浴70℃加熱5分鐘,，取出趁熱過濾，濾液待測,。

[備注]：蔥,、蒜、蘿卜,、韭菜,、芹菜、香菜,、茭白,、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性,。處理這類樣品時(shí),，可采取整株（體）浸提，避免次生物物質(zhì)干擾。

2.檢測樣品的制備：

(1) 空白對照液:

① 取緩沖液2.5ml,，加入1cm比色皿中,，再加入試劑B 100ul，混勻,，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）,。

②加入試劑C 100ul；

③搖勻后立即測試,。

(2) 檢測樣品液:

①取待測樣品液2.5ml,，加入1cm比色皿中，再加入試劑B 100ul,，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）,。

②加入試劑C 100ul；

③搖勻后立即測試,。

3,、檢測樣品測試：

(1) 空白對照測量：

① 將比色皿放入的通道中；

② 按“對照”鍵,，屏幕下方顯示測量時(shí)間,；

③ 檢測結(jié)束后，儀器自動顯示通道檢測空白對照的測試結(jié)果△A0,。

[備注]：a 顯色時(shí)間為3min,，空白對照值應(yīng)≥0.3，當(dāng)空白對照值在＜0.3時(shí),，需重做空白對照,，若重復(fù)多次的空白對照值＜0.3時(shí)，必須更換酶試劑,。

(2) 樣品測量：

① 將比色皿放入的通道中,；

② 按“樣品”鍵，屏幕下方顯示測量時(shí)間,；

③ 檢測結(jié)束后，儀器自動顯示通道檢測樣品的測試結(jié)果△At,。

【判斷標(biāo)準(zhǔn)】

(1) 樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品,；

(2) 抑制率＞50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品，表明被測樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn),，建議用氣相色譜等儀器分析法作進(jìn)一步確認(rèn),。

【注意事項(xiàng)】

(1)加入底物后，應(yīng)迅速混勻,，立即測試,。

(2)所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害，使用時(shí)請做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即擦干并用大量水沖洗,。

(3)檢測試劑請務(wù)必在2~4ºC冰箱保存,。