細(xì)胞信息表

細(xì)胞名稱         U266人骨髓瘤細(xì)胞

種屬            人

組織來源          外周血

生長狀態(tài)          懸浮細(xì)胞

培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型：RPMI1640培養(yǎng)基

                                                FBS:10%

              抗生素：雙抗

              培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%

傳代方法 :

收到細(xì)胞后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿,，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),。

如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代方法：

  1棄去培養(yǎng)基,，用不含鈣,、鎂離子的PBS洗1-2次。

  2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA）,，讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),，隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化,。

懸浮細(xì)胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代,。

  1直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3,，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

  2離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),，1000rpm,，5分鐘，去除上清,，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。

一般沒有特殊說明,，細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法:

70%*培養(yǎng)基,，20%FBS,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

儲(chǔ)存：液氮中長期保存,。

注  1觀察細(xì)胞建議在低倍鏡下觀察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度,。

2在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、細(xì)胞污染等,，請(qǐng)?jiān)谝恢軆?nèi)與我們聯(lián)系。

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