細(xì)胞名稱 人肺腺癌細(xì)胞,;Calu-3
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的,;該患者曾使用過環(huán)磷酰胺、博來霉素,、阿霉素進(jìn)行治療,。該細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;可作轉(zhuǎn)染宿主,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代,;每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:11,,12;D13S317:12,;D16S539:12,,14;D18S51:14,,17,;D19S433:12,13,;D21S11:28,,30;D2S1338:19,;D3S1358:15,,18;D5S818:11,;D7S820:10,,11;D8S1179:11,,15,;FGA:25;TH01:6,,9.3,;TPOX:8;vWA:16,,17,;
同工酶
染色體 56~63,XX,,有若干染色體易位
使用權(quán)限 A類
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋,;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC,、sciencell,、ICLC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,,我們將盡快為您解決,!
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),,請及時或郵件,。
需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問題,請于48h內(nèi)及時反饋,,本公司將竭誠為您服務(wù),!
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部,。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張),。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),,細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),,放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止,。
1000rpm,5min離心,,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng),。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張),。
3. 嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),。
5. 1000rpm,5min離心,,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,,37℃,5%CO2 培養(yǎng),。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的),。
2. 嚴(yán)格無菌操作,,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,,重懸細(xì)胞,。
4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)
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