確定色譜峰保留時(shí)間不穩(wěn)定的原因首先需要找出變化的模式。建議首先檢查泵和溶劑混合裝置,。校驗(yàn)泵是否工作正常,，可以用量筒和秒表來測量流速,。校驗(yàn)流動(dòng)相組成沒有變化，可以在流動(dòng)相中加入跟蹤劑來觀察基線的變化,。如果流動(dòng)相組成是穩(wěn)定的,，基線也應(yīng)該很穩(wěn)定。如果流動(dòng)相組成有變化,，你會(huì)觀察到基線的相應(yīng)變化,。

1、一天之內(nèi)的進(jìn)樣保留時(shí)間一致,，但是不同天數(shù)之間的保留時(shí)間變化

  這種情況下，儀器本身不太可能有問題,。保留時(shí)間變化zui有可能的原因是流動(dòng)相組成的變化,。在反相色譜中，保留因子k和流動(dòng)相中有機(jī)溶劑的體積含量成指數(shù)關(guān)系,。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，如果有機(jī)溶劑含量誤差1%,，那么保留時(shí)間的變化在5%到15%之間,，典型情況在10%左右。建議仔細(xì)稱量有機(jī)溶劑,，的配制流動(dòng)相方法是用質(zhì)量稱量代替體積稱量,。此外，流動(dòng)相如何脫氣也可能導(dǎo)致保留時(shí)間的變化,。的脫氣方法是使用真空超聲脫氣大約一分鐘左右,，這會(huì)zui大程度的減少溶劑蒸汽的揮發(fā)。另一個(gè)方法是用氦氣流噴射,，在流動(dòng)相被氦氣平衡后，氦氣流必須被關(guān)閉,，否則氦氣會(huì)帶走溶劑蒸汽,，溶劑的組成會(huì)由于蒸發(fā)而發(fā)生變化,。

2,、色譜峰保留時(shí)間朝同一個(gè)方向漂移

   如果所有色譜峰的保留時(shí)間都朝同一個(gè)方向漂移，很可能是溫度原因所致,。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),，每℃的變化導(dǎo)致保留時(shí)間變化大約1%到2%左右,。在通常情況下沒有什么問題,，但是在許多地方空調(diào)和暖氣在周末的時(shí)候會(huì)關(guān)閉，然后會(huì)出現(xiàn)樣品在周末的保留時(shí)間會(huì)和平時(shí)不一樣,。使用柱溫箱可以很好的避免這個(gè)問題,。

3、其它原因

  在反相色譜中,，如果分析離子或離子化的樣品，保留時(shí)間會(huì)受到緩沖溶液的離子強(qiáng)度的影響,，但是影響會(huì)很小,，通?？梢院雎圆挥?jì),。典型的狀況是緩沖液的摩爾數(shù)改變20%,，保留時(shí)間變化約1%,。由于緩沖液組分通常是稱量的,，那么大的誤差是不會(huì)發(fā)生的,。