確定色譜峰保留時間不穩(wěn)定的原因首先需要找出變化的模式,。建議首先檢查泵和溶劑混合裝置,。校驗(yàn)泵是否工作正常,，可以用量筒和秒表來測量流速。校驗(yàn)流動相組成沒有變化，可以在流動相中加入跟蹤劑來觀察基線的變化,。如果流動相組成是穩(wěn)定的,，基線也應(yīng)該很穩(wěn)定。如果流動相組成有變化,，你會觀察到基線的相應(yīng)變化,。

1、一天之內(nèi)的進(jìn)樣保留時間一致,，但是不同天數(shù)之間的保留時間變化

  這種情況下,，儀器本身不太可能有問題。保留時間變化zui有可能的原因是流動相組成的變化,。在反相色譜中,，保留因子k和流動相中有機(jī)溶劑的體積含量成指數(shù)關(guān)系。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),，如果有機(jī)溶劑含量誤差1%,，那么保留時間的變化在5%到15%之間，典型情況在10%左右,。建議仔細(xì)稱量有機(jī)溶劑,，的配制流動相方法是用質(zhì)量稱量代替體積稱量。此外,，流動相如何脫氣也可能導(dǎo)致保留時間的變化,。的脫氣方法是使用真空超聲脫氣大約一分鐘左右，這會zui大程度的減少溶劑蒸汽的揮發(fā),。另一個方法是用氦氣流噴射,，在流動相被氦氣平衡后，氦氣流必須被關(guān)閉,，否則氦氣會帶走溶劑蒸汽,，溶劑的組成會由于蒸發(fā)而發(fā)生變化。

2,、色譜峰保留時間朝同一個方向漂移

   如果所有色譜峰的保留時間都朝同一個方向漂移,，很可能是溫度原因所致。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),，每℃的變化導(dǎo)致保留時間變化大約1%到2%左右,。在通常情況下沒有什么問題，但是在許多地方空調(diào)和暖氣在周末的時候會關(guān)閉,，然后會出現(xiàn)樣品在周末的保留時間會和平時不一樣,。使用柱溫箱可以很好的避免這個問題。

3,、其它原因

  在反相色譜中,，如果分析離子或離子化的樣品,，保留時間會受到緩沖溶液的離子強(qiáng)度的影響,，但是影響會很小,，通常可以忽略不計(jì),。典型的狀況是緩沖液的摩爾數(shù)改變20%,，保留時間變化約1%。由于緩沖液組分通常是稱量的,，那么大的誤差是不會發(fā)生的,。