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顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)

來(lái)源:北京元中銳科集成檢測(cè)技術(shù)有限公司   2011年01月21日 14:33  

顯微鏡簡(jiǎn)史
     
      隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,,人們?cè)絹?lái)越需要觀察微觀世界,,顯微鏡正是這樣的設(shè)備,,它突破了人類的視覺(jué)極限,,使之延伸到肉眼無(wú)法看清的細(xì)微結(jié)
構(gòu),。

      顯微鏡是從十五世紀(jì)開(kāi)始發(fā)展起來(lái),。從簡(jiǎn)單的放大鏡的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出來(lái)的單透鏡顯微鏡,,到1847年德國(guó)蔡司研制的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的復(fù)式顯微鏡,,以
及相差,,熒光,偏光,,顯微觀察方式的出現(xiàn),,使之更廣范地應(yīng)用于金屬材料,生物學(xué),,化工等領(lǐng)域,。

顯微鏡的基本光學(xué)原理

一. 折射和折射率

      光線在均勻的各向同性介質(zhì)中,,兩點(diǎn)之間以直線傳播,當(dāng)通過(guò)不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí),,則發(fā)生折射現(xiàn)像,,這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速
度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時(shí),,光線在其介面改變了方向,,并和法線構(gòu)成折射角。

二. 透鏡的性能

      透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的zui基本的光學(xué)元件,,物鏡,、目鏡及聚光鏡等部件均由單個(gè)和多個(gè)透鏡組成。依其外形的不同,,可分為凸透鏡(正透
鏡)和凹透鏡(負(fù)透鏡)兩大類,。當(dāng)一束平行于光軸的光線通過(guò)凸透鏡后相交于一點(diǎn),這個(gè)點(diǎn)稱“焦點(diǎn)”,,通過(guò)交點(diǎn)并垂直光軸的平面,,稱“焦平面”。焦點(diǎn)有兩個(gè),,在物方空間的焦點(diǎn),,稱“物方焦點(diǎn)”,該處的焦平面,,稱“物方焦平面”,;反之,在像方空間的焦點(diǎn),,稱“像方焦點(diǎn)”,,該處的焦平面,稱“像方焦平面”,。

      光線通過(guò)凹透鏡后,,成正立虛像,而凸透鏡則成正立實(shí)像,。實(shí)像可在屏幕上顯現(xiàn)出來(lái),,而虛像不能。

影響成像的關(guān)鍵因素—像差

      由于客觀條件,,任何光學(xué)系統(tǒng)都不能生成理論上理想的像,,各種像差的存在影響了成像質(zhì)量。下面分別簡(jiǎn)要介紹各種像差,。

      1. 色差(Chromatic aberration)

      色差是透鏡成像的一個(gè)嚴(yán)重缺陷,,發(fā)生在多色光為光源的情況下,單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍(lán) 紫 七種組成,,各種光的波長(zhǎng)
不同 ,,所以在通過(guò)透鏡時(shí)的折射率也不同,這樣物方一個(gè)點(diǎn),,在像方則可能形成一個(gè)色斑,。光學(xué)系統(tǒng)zui主要的功能就是消色差。色差一般有位置色差,,放大率色差,。位置色差使像在任何位置觀察都帶有色斑或暈環(huán),使像模糊不清,。而放大率色差使像帶有彩色邊緣,。

      2. 球差(Spherical aberration)

      球差是軸上點(diǎn)的單色相差,是由于透鏡的球形表面造成的,。球差造成的結(jié)果是,,一個(gè)點(diǎn)成像后,不在是個(gè)亮點(diǎn),,而是一個(gè)中間亮邊緣逐漸模糊
的亮斑,,從而影響成像質(zhì)量。
      球差的矯正常利用透鏡組合來(lái)消除,,由于凸,、凹透鏡的球差是相反的,可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來(lái)給予消除,。舊型號(hào)顯微鏡,物鏡的
球差沒(méi)有*矯正,,應(yīng)與相應(yīng)的補(bǔ)償目鏡配合,,才能達(dá)到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差*由物鏡消除,。

      3. 慧差(Coma)

      慧差屬軸外點(diǎn)的單色像差,。軸外物點(diǎn)以大孔徑光束成像時(shí),發(fā)出的光束通過(guò)透鏡后,,不再相交一點(diǎn),,則一光點(diǎn)的像便會(huì)得到一逗點(diǎn)狀,型如慧
星,,故稱“慧差”,。

      4. 像散(Astigmatism)

      像散也是影響清晰度的軸外點(diǎn)單色像差。當(dāng)視場(chǎng)很大時(shí),,邊緣上的物點(diǎn)離光軸遠(yuǎn),,光束傾斜大,經(jīng)透鏡后則引起像散。像散使原來(lái)的物點(diǎn)在成
像后變成兩個(gè)分離并且相互垂直的短線,,在理想像平面上綜合后,,形成一個(gè)橢圓形的斑點(diǎn)。像散是通過(guò)復(fù)雜的透鏡組合來(lái)消除,。

      5. 場(chǎng)曲(Curvature of field)

      場(chǎng)曲又稱“像場(chǎng)彎曲”,。當(dāng)透鏡存在場(chǎng)曲時(shí),整個(gè)光束的交點(diǎn)不與理想像點(diǎn)重合,,雖然在每個(gè)特定點(diǎn)都能得到清晰的像點(diǎn),,但整個(gè)像平面則是
一個(gè)曲面。這樣在鏡檢時(shí)不能同時(shí)看清整個(gè)像面,,給觀察和照相造成困難,。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場(chǎng)物鏡,這種物鏡已經(jīng)矯正了場(chǎng)曲,。

      6. 畸變(Distortion)

      前面所說(shuō)各種像差除場(chǎng)曲外,,都影響像的清晰度?;兪橇硪环N性質(zhì)的像差,,光束的同心性不受到破壞。因此,,不影響像的清晰度,,但使像與
原物體比,在形狀上造成失真,。

顯微鏡的成像(幾何成像)原理

      顯微鏡之所以能將被檢物體進(jìn)行放大,,是通過(guò)透鏡來(lái)實(shí)現(xiàn)的。單透鏡成像具有像差,,嚴(yán)重影響成像質(zhì)量,。因此顯微鏡的主要光學(xué)部件都由透鏡
組合而成。從透鏡的性能可知,,只有凸透鏡才能起放大作用,,而凹透鏡不行。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,,但相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡,。為便于了解顯微鏡的放大原理,簡(jiǎn)要說(shuō)明一下凸透鏡的5種成像規(guī)律:

      (1) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),,則在像方二倍焦距以內(nèi),、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)像;
      (2) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí),,則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)像,;
      (3) 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),,焦點(diǎn)以外時(shí),則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像,;
      (4) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),,則像方不能成像;
      (5) 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí),,則像方也無(wú)像的形成,,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像。

      顯微鏡的成像原理就是利用上述(3)和(5)的規(guī)律把物體放大的,。當(dāng)物體處在物鏡前F-2F(F為物方焦距)之間,,則在物鏡像方的二倍焦距以
外形成放大的倒立實(shí)像。在顯微鏡的設(shè)計(jì)上,,將此像落在目鏡的一倍焦距F1之內(nèi),,使物鏡所放大的*次像(中間像),又被目鏡再一次放大,,zui終在目鏡的物方(中間像的同側(cè)),、人眼的明視距離(250mm)處形成放大的直立(相對(duì)中間像而言)虛像。因此,,當(dāng)我們?cè)阽R檢時(shí),,通過(guò)目鏡(不另加轉(zhuǎn)換棱鏡)看到的像于原物體的像,方向相反,。

顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)簡(jiǎn)介

      顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)有三種光學(xué)系統(tǒng),。

      1 . 長(zhǎng)筒光學(xué)系統(tǒng)。
      2 . 無(wú)限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng):是較*的光路設(shè)計(jì),,它體現(xiàn)了無(wú)限遠(yuǎn)校正方式的*性,。光線通過(guò)物鏡后成為平行光束通過(guò)鏡筒,并在結(jié)像
透鏡處折射或完成無(wú)像差的中間像,。物鏡與觀察筒內(nèi)結(jié)像透鏡之間可添加光學(xué)附件,,而不影響總放大倍數(shù)。另外這種光學(xué)系統(tǒng)不需要安裝附加校正透鏡,,都能得到*的顯微圖像,。
      3. 無(wú)限遠(yuǎn)雙重色差校正光學(xué)系統(tǒng):是目前的光路設(shè)計(jì),,不但能矯正位置色差,,同時(shí)還能矯正倍率色差可提高水平分辨率12%,提供
zui高反差,、zui高襯度,、zui高分辨率的zui銳利圖象。 

 

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