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色譜峰保留時(shí)間變化常見(jiàn)原因和解決方法

來(lái)源:上海惠分科學(xué)分析儀器有限公司   2017年03月28日 16:57  

   確定色譜峰保留時(shí)間不穩(wěn)定的原因首先需要找出變化的模式。保留時(shí)間在多次進(jìn)樣間隨機(jī)變化,。建議首先檢查泵和溶劑混合裝置,。校驗(yàn)泵是否工作正常,,可以用量筒和秒表來(lái)測(cè)量流速,。校驗(yàn)流動(dòng)相組成沒(méi)有變化,可以在流動(dòng)相中加入跟蹤劑來(lái)觀察基線的變化,。如果流動(dòng)相組成是穩(wěn)定的,,基線也應(yīng)該很穩(wěn)定。如果流動(dòng)相組成有變化,,你會(huì)觀察到基線的相應(yīng)變化,。舉例說(shuō)明,如果你使用反相條件,,UV檢測(cè)器,,可以在有機(jī)相溶劑中加入0.1%的丙酮,監(jiān)測(cè)254 nm下的基線變化,。另一種方法也可以,,你需要人工配制流動(dòng)相,然后通過(guò)溶劑混合裝置,。如果保留時(shí)間的變化消失了,,問(wèn)題就出在溶劑混合裝置上。

 一天之內(nèi)的進(jìn)樣保留時(shí)間一致,,但是不同天數(shù)之間的保留時(shí)間變化

   這種情況下,,儀器本身不太可能有問(wèn)題。保留時(shí)間變化zui有可能的原因是流動(dòng)相組成的變化,。在反相色譜中,,保留因子k和流動(dòng)相中有機(jī)溶劑的體積含量成指數(shù)關(guān)系。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),,如果有機(jī)溶劑含量誤差1%,,那么保留時(shí)間的變化在5%到15%之間,典型情況在10%左右,。建議仔細(xì)稱量有機(jī)溶劑,的配制流動(dòng)相方法是用質(zhì)量稱量代替體積稱量,。

   此外,,流動(dòng)相如何脫氣也可能導(dǎo)致保留時(shí)間的變化。的脫氣方法是使用真空超聲脫氣大約一分鐘左右,,這會(huì)zui大程度的減少溶劑蒸汽的揮發(fā),。另一個(gè)方法是用氦氣流噴射,在流動(dòng)相被氦氣平衡后,,氦氣流必須被關(guān)閉,,否則氦氣會(huì)帶走溶劑蒸汽,,溶劑的組成會(huì)由于蒸發(fā)而發(fā)生變化。

    如果樣品組成是離子狀態(tài)或者離子化的,,那么控制流動(dòng)相的pH值非常重要,。小到0.1單位的pH變化會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間漂移10%左右。所以準(zhǔn)確測(cè)量pH值并保證pH儀被很好地的校準(zhǔn),。在反相色譜中,,隨著流動(dòng)相pH值的升高,酸保留時(shí)間會(huì)減少,,堿的保留時(shí)間會(huì)增加,。

  

色譜峰保留時(shí)間朝同一個(gè)方向漂移

    如果所有色譜峰的保留時(shí)間都朝同一個(gè)方向漂移,很可能是溫度原因所致,。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),,每℃的變化導(dǎo)致保留時(shí)間變化大約1%到2%左右。在通常情況下沒(méi)有什么問(wèn)題,,但是在許多地方空調(diào)和暖氣在周末的時(shí)候會(huì)關(guān)閉,,然后會(huì)出現(xiàn)樣品在周末的保留時(shí)間會(huì)和平時(shí)不一樣。使用柱溫箱可以很好的避免這個(gè)問(wèn)題,。

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