一,、實(shí)驗(yàn)原理

所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液,、唾液、尿液,、腦脊液和乳汁中,。 有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的分子機(jī)制剛剛開始研究,。 外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長,，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。

外泌體（Exosome）主要檢測指標(biāo)為CD63、CD9,、CD81,、Tsg101、Alix,、HSP70等,，針對外泌體的定性檢測,，至少選擇2-3個(gè)指標(biāo)就能滿足文章發(fā)表就可以。大部分文獻(xiàn)中沒有檢測內(nèi)參,，個(gè)別文章中使用了Actin、GAPDH和Tubulin作為內(nèi)參進(jìn)行檢測,，外泌體中的Actin,、GAPDH和Tubulin的表達(dá)豐度相對于正常細(xì)胞樣品中的較低，可能會(huì)檢測不到任何條帶或者條帶微弱,。

二,、實(shí)驗(yàn)流程

1. 外泌體BCA法定量。

2. 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳（SDS-PAGE）,。

3. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到PVDF膜,。

4. 膜的封閉和抗體孵育。

5. 結(jié)果檢測,。