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抗體定制技術服務|實驗技術服務

時間:2015/7/1閱讀:601
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關鍵詞:抗體定制技術服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌抗體定制技術服務|實驗技術服務原裝,質(zhì)量保證,*,。
抗體定制技術服務|實驗技術服務——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費,。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
產(chǎn)品品牌:   http://www.,。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>抗體檢測服務
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)
Dot Blot(斑點印跡實驗)
Western Blot(免疫印跡實驗)
IHC (免疫組織化學實驗)
抗體標記服務
HRP(辣根過氧化物酶)
Biotin(生物素)
操作方法
⑴準備好脾細胞,。
⑵在50ml沉淀管中混合108脾細胞和107小鼠骨髓瘤細胞,,并加入50ml2.5%FCS-1640液。
⑶室溫400g離心3min,,使細胞沉淀,。
⑷移去上清液,。
⑸輕敲管底部,使沉淀流動,,把沉淀管放于40℃水浴中,,使其達融合溫度。
⑹加預熱至40℃的50%PEG0.8ml,,用1ml吸管緩慢滴加,,邊加邊搖沉淀管,肉眼觀察可見有顆粒出現(xiàn),,滴加過程要求持續(xù)2min,。
⑺加1ml1640液,邊加邊搖動,,持續(xù)1min,。
⑻重復⑺一次。
⑼加1ml1640液,,邊加邊搖動,,持續(xù)0.5min。
⑽重復⑼一次,。
⑾加1640液15ml,。
⑿室溫,400g離心1min,,使細胞沉淀,。
⒀去上清,輕敲管底部,,加25ml含有HAT的*1640液,。
⒁往已于前一日種有飼養(yǎng)細胞的40孔塑料培養(yǎng)盤中滴加融合的細胞液,每孔1滴(約0.05ml),。
⒂輕搖后,,放入5%CO2飽和濕度的37℃溫箱中培育。
⒃第3,、6,、9、10日換入含HAT的*1640培養(yǎng)液,。注意輕輕吸取上清液,,勿將固定于孔底的細胞吸出,根據(jù)需要加入適量的飼養(yǎng)細胞,。
⒄于第12,、15日加入含有HAT的*1640培養(yǎng)液。在每次換液前用倒置顯微鏡觀察,,大約在10天左右就可觀察到雜交瘤細胞生長出來,。大多數(shù)雜交瘤細胞在10~20天內(nèi)出現(xiàn),,但也有在1個月左右才能出現(xiàn)的。雜交瘤細胞出現(xiàn)后,,吸取上清液,,檢查抗體。
⒅對繼續(xù)生長的雜交瘤細胞進行增殖傳代,。在傳代過程中,,依情況取消HAT液和*1640液而代之以10%FCS-1640液。同時保存于液氮和進行克隆化,,在這期間每代都要檢查抗體,,以防止產(chǎn)生抗體細胞的變異和丟失。

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