基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務

時間：2015/7/1閱讀：293

關鍵詞:基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務原裝,，質量保證,*。
基因組DNA提取技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
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測序實驗流程：
DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒,。氯化芐具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化,，從而破壞細胞壁的特性,。本制品利用了氯化芐的這一特性，將植物樣品凍結融解后,，再使用Pipet Tip的將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細胞壁,。
保存方式
室溫,。低溫保存可能會有沉淀析出,。如果發(fā)生析出現(xiàn)象，請于50℃溶解后,，再于室溫保存。
操作方法
全套操作約需1小時,，分勻漿,、細胞裂解、除蛋白,、DNA純化等步驟，詳細說明如下,。
一. 勻漿和細胞裂解,。
使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟,，具體說明如下：
【從動物組織中提取基因組DNA】
使用研缽進行勻漿時：
① 取1～100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中,，快速用力展研成勻漿,。
注）下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
A．富含DNA酶的胰臟,、脾臟,、胸腺,、淋巴等組織。
B．富含膠原蛋白的皮膚,、肌腱等組織,。
C．富含角質蛋白的組織或堅硬的組織（如骨骼）等,。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1，溫和研磨30秒鐘,。
注）使用上述①-注）的實驗材料時,，請在加入Solution A及RNase A1后,，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中,。如果勻漿體積不足650 μl，請補充Solution A至650 μl,，65℃保溫5分鐘,。
二.使用研磨棒進行勻漿時：
① 取1～100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊狀,。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中,，充分振蕩混合后,，65℃保溫5分鐘。
三.使用懸浮培養(yǎng)的動物細胞時：
① 使用Collection Tube收集1×105～1.5×107的細胞懸浮液,，5,000 rpm離心5分鐘,，棄上清（細胞培養(yǎng)液）。
② 加入150 μl的滅菌蒸餾水或PBS懸浮細胞。
③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1,，激烈振蕩15秒鐘,，然后室溫靜置1分鐘。
四.使用貼壁細胞時：
① 棄盡培養(yǎng)液,，向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A,，室溫靜置1分鐘。
注）96孔板等的每個孔中一次容納不了650 μl 溶液時,，請分數(shù)次處理細胞,。
② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養(yǎng)細胞，取650 μl的細胞懸浮液轉移至Collection Tube中,。
③ 加入0.8 μl的RNase A1,，激烈振蕩15秒鐘，然后室溫靜置1分鐘,。

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