關(guān)鍵詞:SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡(jiǎn)介：世界*品牌SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,，質(zhì)量保證,*,。
SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,，承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí),，我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn),。另一方面，我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌：   http://www.,。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
首先通過(guò)PCR擴(kuò)增含有SNP的基因組片段，然后通過(guò)序列特異性引物實(shí)現(xiàn)單堿基延伸,，隨后樣品分析物與芯片基質(zhì)共結(jié)晶后在真空管中受瞬時(shí)納秒 (10-9s) 強(qiáng)激光激發(fā),。核酸分子因此解吸附成為單電荷離子，由于電場(chǎng)中離子飛行時(shí)間與離子質(zhì)量成反比，通過(guò)檢測(cè)核酸分子在真空管中的飛行時(shí)間而獲得樣品分析物的分子量,，從而檢測(cè)出SNP位點(diǎn)信息,。
1.TaqMan探針?lè)?針對(duì)染色體上的不同SNP位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)PCR引物和TaqMan探針，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增,。探針的5'-端和3'-端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán),。當(dāng)溶液中存在PCR產(chǎn)物時(shí)，該探針與模板退火,，即產(chǎn)生了適合于核酸外切酶活性的底物,，從而將探針5'-端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，破壞兩熒光分子間的PRET,，發(fā)出熒光,。通常用于少量SNP位點(diǎn)分析。
2.SNaPshot法 該技術(shù)由美國(guó)應(yīng)用生物公司(ABI)開發(fā),，是基于熒光標(biāo)記單堿基延伸原理的分型技術(shù),，也稱小測(cè)序，主要針對(duì)中等通量的SNP分型項(xiàng)目,。在一個(gè)含有測(cè)序酶,、四種熒光標(biāo)記ddNTP、緊臨多態(tài)位點(diǎn)5'-端的不同長(zhǎng)度延伸引物和PCR產(chǎn)物模板的反應(yīng)體系中,，引物延伸一個(gè)堿基即終止,，經(jīng)ABI測(cè)序儀檢測(cè)后，根據(jù)峰的移動(dòng)位置確定該延伸產(chǎn)物對(duì)應(yīng)的SNP位點(diǎn),，根據(jù)峰的顏色可得知摻入的堿基種類,，從而確定該樣本的基因型。對(duì)于PCR產(chǎn)物模板可通過(guò)多重PCR反應(yīng)體系來(lái)獲得,。通常用于10-30個(gè)SNP位點(diǎn)分析,。
3.HRM法 高分辨率熔解曲線分析(HRM)是近幾年興起的SNP研究工具，它通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)升溫過(guò)程中雙鏈DNA熒光染料與PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的結(jié)合情況,，來(lái)判斷是否存在SNP,，而且不同SNP位點(diǎn)、是否是雜合子等都會(huì)影響熔解曲線的峰形,，因此HRM分析能夠有效區(qū)分不同SNP位點(diǎn)與不同基因型,。這種檢測(cè)方法不受突變堿基位點(diǎn)與類型的局限，無(wú)需序列特異性探針,，在PCR結(jié)束后直接運(yùn)行高分辨率熔解,，即可完成對(duì)樣品基因型的分析。該方法無(wú)需設(shè)計(jì)探針,，操作簡(jiǎn)便,、快速,，成本低，結(jié)果準(zhǔn)確,，并且實(shí)現(xiàn)了真正的閉管操作,。
4.Mass Array法 MassARRAY分子量陣列技術(shù)是Sequenom公司推出的世界上的基因分析工具，通過(guò)引物延伸或切割反應(yīng)與靈敏,、可靠的MALDI-TOF-MS技術(shù)相結(jié)合,，實(shí)現(xiàn)基因分型檢測(cè)?；贛assARRAY平臺(tái)的iPLEX GOLD技術(shù)可以設(shè)計(jì)zui高達(dá)40重的PCR反應(yīng)和基因型檢測(cè),，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)靈活，分型結(jié)果準(zhǔn)確性高,。根據(jù)應(yīng)用需要,，對(duì)數(shù)十到數(shù)百個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行數(shù)百至數(shù)千份樣本檢測(cè)時(shí)，MassARRAY具有*的性價(jià)比,，特別適合于對(duì)全基因組研究發(fā)現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,，或者是有限數(shù)量的研究位點(diǎn)已經(jīng)確定的情況。
5.Illumina BeadXpress法 采用Illumina公司的BeadXpress系統(tǒng)進(jìn)行批量SNP位點(diǎn)檢測(cè),，可以同時(shí)檢測(cè)1-384個(gè)SNP位點(diǎn),，往往用于基因組芯片結(jié)果確認(rèn)，適合高通量檢測(cè),。微珠芯片具有高密度,、高重復(fù)性、高靈敏度,、低上樣量,、定制靈活等特點(diǎn)，*的集成密度,，從而獲得*的檢測(cè)篩選速度,，在高通量篩選時(shí)可顯著降低成本。