關(guān)鍵詞:SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡介：世界*品牌SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,，質(zhì)量保證,*,。
SNP分型|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,，承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,，我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn),。另一方面，我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
產(chǎn)品品牌： http://www.,。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序?qū)嶒?yàn)流程：
首先通過PCR擴(kuò)增含有SNP的基因組片段，然后通過序列特異性引物實(shí)現(xiàn)單堿基延伸,，隨后樣品分析物與芯片基質(zhì)共結(jié)晶后在真空管中受瞬時納秒 (10-9s) 強(qiáng)激光激發(fā),。核酸分子因此解吸附成為單電荷離子，由于電場中離子飛行時間與離子質(zhì)量成反比,，通過檢測核酸分子在真空管中的飛行時間而獲得樣品分析物的分子量,，從而檢測出SNP位點(diǎn)信息,。
1.TaqMan探針法 針對染色體上的不同SNP位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)PCR引物和TaqMan探針，進(jìn)行實(shí)時熒光PCR擴(kuò)增,。探針的5'-端和3'-端分別標(biāo)記一個報(bào)告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán),。當(dāng)溶液中存在PCR產(chǎn)物時，該探針與模板退火,，即產(chǎn)生了適合于核酸外切酶活性的底物,，從而將探針5'-端連接的熒光分子從探針上切割下來，破壞兩熒光分子間的PRET,，發(fā)出熒光,。通常用于少量SNP位點(diǎn)分析。
2.SNaPshot法 該技術(shù)由美國應(yīng)用生物公司(ABI)開發(fā),，是基于熒光標(biāo)記單堿基延伸原理的分型技術(shù)，也稱小測序,，主要針對中等通量的SNP分型項(xiàng)目,。在一個含有測序酶、四種熒光標(biāo)記ddNTP,、緊臨多態(tài)位點(diǎn)5'-端的不同長度延伸引物和PCR產(chǎn)物模板的反應(yīng)體系中,，引物延伸一個堿基即終止，經(jīng)ABI測序儀檢測后,，根據(jù)峰的移動位置確定該延伸產(chǎn)物對應(yīng)的SNP位點(diǎn),，根據(jù)峰的顏色可得知摻入的堿基種類，從而確定該樣本的基因型,。對于PCR產(chǎn)物模板可通過多重PCR反應(yīng)體系來獲得,。通常用于10-30個SNP位點(diǎn)分析。
3.HRM法 高分辨率熔解曲線分析(HRM)是近幾年興起的SNP研究工具,，它通過實(shí)時監(jiān)測升溫過程中雙鏈DNA熒光染料與PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的結(jié)合情況,，來判斷是否存在SNP，而且不同SNP位點(diǎn),、是否是雜合子等都會影響熔解曲線的峰形,，因此HRM分析能夠有效區(qū)分不同SNP位點(diǎn)與不同基因型。這種檢測方法不受突變堿基位點(diǎn)與類型的局限,，無需序列特異性探針,，在PCR結(jié)束后直接運(yùn)行高分辨率熔解，即可完成對樣品基因型的分析,。該方法無需設(shè)計(jì)探針,，操作簡便、快速,，成本低,，結(jié)果準(zhǔn)確,，并且實(shí)現(xiàn)了真正的閉管操作。
4.Mass Array法 MassARRAY分子量陣列技術(shù)是Sequenom公司推出的世界上的基因分析工具,，通過引物延伸或切割反應(yīng)與靈敏,、可靠的MALDI-TOF-MS技術(shù)相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)基因分型檢測,?；贛assARRAY平臺的iPLEX GOLD技術(shù)可以設(shè)計(jì)zui高達(dá)40重的PCR反應(yīng)和基因型檢測，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)靈活,，分型結(jié)果準(zhǔn)確性高,。根據(jù)應(yīng)用需要，對數(shù)十到數(shù)百個SNP位點(diǎn)進(jìn)行數(shù)百至數(shù)千份樣本檢測時,，MassARRAY具有*的性價(jià)比,，特別適合于對全基因組研究發(fā)現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，或者是有限數(shù)量的研究位點(diǎn)已經(jīng)確定的情況,。
5.Illumina BeadXpress法 采用Illumina公司的BeadXpress系統(tǒng)進(jìn)行批量SNP位點(diǎn)檢測,，可以同時檢測1-384個SNP位點(diǎn)，往往用于基因組芯片結(jié)果確認(rèn),，適合高通量檢測,。微珠芯片具有高密度、高重復(fù)性,、高靈敏度,、低上樣量、定制靈活等特點(diǎn),，*的集成密度,，從而獲得*的檢測篩選速度，在高通量篩選時可顯著降低成本,。
