關鍵詞:SILAC實驗服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌SILAC實驗服務|實驗技術服務原裝,質量保證,*,。
SILAC實驗服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費,。在獲得重組蛋白產品的同時,我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗,。另一方面,,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
產品品牌: http://www.。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序實驗流程:
SILAC即細胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標記技術(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,,SILAC),其基本原理是分別采用含有輕,、中或重型同位素必需氨基酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞(用于SILAC的穩(wěn)定同位素氨基酸主要有Lys和Arg),,新合成的蛋白質即嵌合了同位素氨基酸,如此培養(yǎng)5-6代后,,細胞的所有蛋白質均被同位素標記上,。經(jīng)處理因素刺激后,等量混合各類型蛋白質,,然后經(jīng)SDS-PAGE分離和質譜分析,,通過比較一級質譜圖中同位素峰型的面積大小進行相對定量,同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而鑒定蛋白質,。
由于SILAC標記技術是體內標記技術,,幾乎不影響細胞的功能,同時靈敏度高,,因此其在蛋白質組學相關領域中得到了廣泛的應用,,如比較蛋白質組學,蛋白質與蛋白質相互作用,,蛋白質與DNA相互作用,,蛋白質與RNA相互作用等領域。
與體外標記技術相比,,SILAC屬于體內標記,,具有以下技術優(yōu)勢
1、高通量,,可同時鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千種蛋白質,;
2、定量,,降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異,;
3,、線性定量范圍廣;
4,、靈敏度更高,,蛋白質需要量明顯減少;
5,、標記采用的是體內標記技術,,更接近樣品真實狀態(tài)。
SILAC技術服務內容
1,、細胞同位素標記,;
3、SDS-PAGE分離,;
4,、胰酶酶切后液相分離和質譜分析;
5,、數(shù)據(jù)庫檢索及蛋白質定量分析,;
6、差異蛋白的生物信息學分析
7,、實驗報告提交,。
實驗服務報告內容
1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結果,;
2 ,、顧客蛋白質對應的質譜峰圖;
3,、SILAC實驗完整的實驗步驟,、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等,。
技術服務優(yōu)勢
1,、靈敏度高,檢測限低,,可檢測出低豐度蛋白,;
2、分離能力強,,分析范圍廣,,iTRAQ可以對任何類型的蛋白質進行分離鑒定,包括高分子量蛋白質,、酸性蛋白和堿性蛋白,,膜蛋白和不溶性蛋白;
3、高通量:同時對8個樣本進行分析,,提高了實驗通量,,可同時對多個時間點或不同處理的蛋白質進行分析;
4,、結果可靠:定性與定量分析結果更加可靠;
5,、自動化程度高:液相與質譜連用,,自動化操作,分析速度快,,分離效果好,。