關(guān)鍵詞:454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務(wù)|實(shí)驗技術(shù)服務(wù)
簡介：世界*品牌454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務(wù)|實(shí)驗技術(shù)服務(wù)原裝,，質(zhì)量保證,*,。
454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務(wù)|實(shí)驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗及實(shí)驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費(fèi),。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,，我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗。另一方面,，我們所有的實(shí)驗數(shù)據(jù)真實(shí)可信,，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗報告重復(fù)我們的實(shí)驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌：454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務(wù)|實(shí)驗技術(shù)服務(wù) http://www.,。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實(shí)驗描述
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>1、文庫制備：根據(jù)樣品的種類和實(shí)驗?zāi)康?，將基因組DNA/cDNA段化處理至400-800bp間,，經(jīng)末端修復(fù)與特異性接頭連接等修飾后變性處理回收單鏈的DNA（sstDNA）；
Roche <wbr>454（GS <wbr>FLX <wbr>Titanium <wbr>System）超高通量測序技
2,、Emulsion PCR：特定比例的單鏈DNA文庫被固定在特別設(shè)計的DNA捕獲磁珠上,，使大部分磁珠磁珠攜帶了一個*的單鏈DNA斷,。磁珠結(jié)合的文庫被擴(kuò)增試劑乳化,，形成油包水的混合物，每個*的片斷在自己的微反應(yīng)器里進(jìn)行獨(dú)立的擴(kuò)增,，而不受其他的競爭性或者污染性序列的影響,。整個片段文庫的擴(kuò)增平行進(jìn)行。擴(kuò)增后產(chǎn)生了幾百萬個相同的拷貝,。隨后,，乳液混合物被打破，擴(kuò)增后仍結(jié)合在磁珠上的段既可被回收純化用于后續(xù)的測序?qū)嶒灒?br>Roche <wbr>454（GS <wbr>FLX <wbr>Titanium <wbr>System）超高通量測序技
3,、測序反應(yīng)：攜帶DNA的珠子與其他反應(yīng)物混合物,，隨后放入PTP板中進(jìn)行后繼的測序。PTP孔的直徑（29um）只能容納一個珠子（20um）,。然后將PTP板放置在GS FLX中,，測序開始。每一個與模板鏈互補(bǔ)的核苷酸的添加都會產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的信號,，并被CCD照相機(jī)所捕獲,；
Roche <wbr>454（GS <wbr>FLX <wbr>Titanium <wbr>System）超高通量測序技
4、數(shù)據(jù)分析：GS FLX系統(tǒng)在10小時的運(yùn)行當(dāng)中可獲得100多萬個讀長,，讀取超過4-6億個堿基信息,，通過GS FLX系統(tǒng)提供兩種不同的生物信息學(xué)工具對測序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
技術(shù)特點(diǎn)：
? 速度快,，一個測序反應(yīng)耗時10個小時,，獲得4-6億(400-600M)個堿基對。比傳統(tǒng)的Sanger測序的方法快100倍,；
? 讀長長,，單個序列的讀長更長，平均可達(dá)到450個堿基左右,；
? 通量高,，每個反應(yīng)可以得到超過100萬個序列讀長，成本大大降低；
? 準(zhǔn)確度高,，讀長超過400bp時,，單一讀長的準(zhǔn)確性可以超過99%；
? 一致性好,，測序結(jié)果一致性超過99.99%,；
? 可以進(jìn)行Pair－End測序研究；
? 簡便,，不需要進(jìn)行建庫,、克隆挑取、質(zhì)粒提取等工作,，一個人可以在一天內(nèi)完成一個微生物物種的測序工作,。
GS FLX系統(tǒng)的應(yīng)用
全基因組測序
多達(dá)120 Mb的未知基因組的測序
－生成基因組結(jié)構(gòu)概圖
－研究DNA序列的組織，分布和信息
－基因篩查：尋找新基因,，定位和功能
－和其他基因組進(jìn)行比較研究
全基因組進(jìn)行測序,，例如微生物基因，BAC和YAC克隆測序,。
比較基因組研究
－識別單堿基突變
－識別突變熱點(diǎn)和保守區(qū)域
－識別插入或者缺失的基因
－斷定基因型和表型之間的相關(guān)關(guān)系（比如,，研究藥物抗性的遺傳基礎(chǔ)）
－ 基于基因測序變化進(jìn)行毒性預(yù)測
－進(jìn)行流行病學(xué)分析
－了解工業(yè)生產(chǎn)菌株和它們的親代菌株序列上的差異作為進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)菌株開發(fā)的遺傳基礎(chǔ)
－進(jìn)行宏基因組 （metagenomics）研究
－古代化石DNA 測序研究
利用配對末端方法（Pair-End Tag）將Contigs拼接成Scaffolds。
轉(zhuǎn)錄組和基因調(diào)節(jié)研究
基于短Tags,，ESTs, ChIP,，或者GIS-PET序列的高通量轉(zhuǎn)錄組分析，或者miRNA 序列的基因組范圍識別,，小分子和非編碼RNA的測序,。
研究DNA的甲基化模式來進(jìn)行基因調(diào)節(jié)的研究。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析
PCR產(chǎn)物的超精細(xì)測序（應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究的重測序）
－在混合的腫瘤樣本中識別體細(xì)胞突變
－在群體水平上發(fā)現(xiàn)高可信度的SNP位點(diǎn)
