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上海乾思生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

18901934629

原代細(xì)胞凍存技術(shù)

時(shí)間：2011/11/11閱讀：1142
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細(xì)胞1,、選用生長(zhǎng)情況好,，數(shù)量較多的原代細(xì)胞，凍存前一天換液一次,。
細(xì)胞2,、貼壁細(xì)胞需用0.25％胰酶常規(guī)消化將細(xì)胞消化下來,，將細(xì)胞懸液收集至離心管中。
細(xì)胞3,、1000rpm離心5分鐘,，棄上清液。
細(xì)胞4,、沉淀加含DMSO的培養(yǎng)液,，計(jì)數(shù)，調(diào)整至（1-10）×106/ml,。
細(xì)胞5,、將懸液分至凍存管中，每管1 ml,。
細(xì)胞6,、密封凍存管，封口一定要嚴(yán),，否則復(fù)蘇時(shí)易出現(xiàn)爆裂,。
細(xì)胞7、用記號(hào)筆標(biāo)明細(xì)胞種類,，凍存日期,。
細(xì)胞8、按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃過夜）→液氮,。

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