1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì):總體而言,，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源,、無機(jī)鹽,、生長因子、水及能源,，但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,，不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基,。自養(yǎng)型微生物能從簡單的元機(jī)物合成自身需要的糖類,、脂類、蛋白質(zhì),、核酸,、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基*可以（或應(yīng)該）由簡單的無機(jī)物組成,。例如,，培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌（Thiobacillus thiooxdans）的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制過程中并末專門加入其他碳源物質(zhì),，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源,。 就微生物主要類型而言,，有細(xì)菌、放線菌,、酵母菌,、霉菌、原生動(dòng)物,、藻類及病毒之分,，培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基）培養(yǎng)細(xì)菌,，用高氏I號合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,，培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基,。2,、營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適:培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長良好，營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時(shí)不能滿足微生物正常生長所需,，濃度過高時(shí)則可能對微生物生長起抑制作用,，例如高濃度糖類物質(zhì)、無機(jī)鹽,、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長,，反而起到抑菌或殺菌作用。另外,，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和（或）代謝產(chǎn)物的形成和積累,，其中碳氮比（C/N）的影響較大。嚴(yán)格地講,，碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值,，有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如,，在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中,，培養(yǎng)基碳氮比為4/l時(shí)，菌體大量繁殖,，谷氨酸積累少,；當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/l時(shí)，菌體繁殖受到抑制,，谷氨酸產(chǎn)量則大量增加,。再如，在抗生素發(fā)酵生產(chǎn)過程中,，可以通過控制培養(yǎng)基中*氮（或碳）源與遲效氮（或碳）源之間的比例來控制菌體生長與抗生素的合成協(xié)調(diào),。3、控制pH條件:培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的zui適pH條件各不相同,，一般來講，細(xì)菌與放線菌適于在pH7～7.5范圍內(nèi)生長,，酵母菌和霉菌通常在pH4.5～6范圍內(nèi)生長,。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中,，由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,，若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,，往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或（和）代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,，為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4 和K2HPO4）組成的混合物,。K2HPO4溶液呈堿性,，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8,。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時(shí),，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物，培養(yǎng)基pH不會(huì)過度降低,；如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基pH也不會(huì)過度升高,。但KH2PO4 和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍（pH6.4～7.2）內(nèi)起調(diào)節(jié)作用,。有些微生物，如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,，上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,，此時(shí)可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽（如CaCO3）來進(jìn)行調(diào)節(jié)，CaCO3難溶于水,，不會(huì)使培養(yǎng)基pH過度升高,，但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸，同時(shí)釋放出CO2,，將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi),。 在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng)，如氨基酸,、肽,、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì)，也可起到緩沖劑的作用,。4,、控制氧化還原電位（redox　potential）: 不同類型微生物生長對氧化還原電位（F）的要求不一樣,，一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時(shí)可正常生長，一般以+0.3一+0.4V為宜,，厭氧性微生物只能在F值低于+0.1V條件下生長,，兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時(shí)進(jìn)行好氧呼吸，在+0.1V以下時(shí)進(jìn)行發(fā)酵,。F值與氧分壓和pH有關(guān),，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下,，可通過增加通氣量（如振蕩培養(yǎng),、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑,，從而增加F值,；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫,、半胱氨酸,、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質(zhì)可降低F值,。5,、原料來源的選擇:在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中,，培養(yǎng)基用量很大,，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。例如,，在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中,，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）,、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料,。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水,、廢渣作原料,，而在我國農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料,。另外,，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮,、米糠,、玉米漿、酵母浸膏,、酒糟,、豆餅,、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料,。6,、滅菌處理:要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染,，因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌,。對培養(yǎng)基而言，更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌,。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15～30min可達(dá)到滅菌目的,。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖,、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/ cm2,，112.6℃15～30min進(jìn)行滅菌,，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,，再與其他已滅菌的成分混合,；長時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣,、鎂,、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，因此,，在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),，常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑，避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）,。還可以將含鈣、鎂,、鐵等離子的成分與磷酸鹽,、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌，然后再混合,，避免形成沉淀,；高壓蒸汽滅菌后，培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變（一般使pH降低）,，可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,，在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整,。在配制培養(yǎng)基過程中，泡沫的存在對滅菌處理極不利,，因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋?，使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,，或適當(dāng)提高滅,。