液相色譜系統(tǒng)大多使用液體自動進樣器引入樣品,,正確使用自動進樣器是液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件,用自動進樣器注入適當(dāng)體積的標(biāo)準(zhǔn)樣品可為峰高和峰面積的測量提供小于1%的標(biāo)準(zhǔn)偏差。對于液相色譜而言,,無論是手動進樣器或是自動進樣器都是用六通閥進樣的,,只是自動進樣的較手動進樣器的死體積較大,多了計量泵和一部分聯(lián)接管線。
1.基線不穩(wěn),,鬼峰增多
現(xiàn)象:Fig1a和Fig1b分析的是同一標(biāo)準(zhǔn)品,。Fig1a基線不穩(wěn),鬼峰增多;而Fig1b基線穩(wěn)定,,為正常圖譜,。
Fig1a是基線不穩(wěn),鬼峰增多的圖譜
Fig1b是正常的圖譜,,同時是清洗干凈后的圖譜
原因:在排除了泵,,流動相和檢測器問題后,這種現(xiàn)象說明進樣系統(tǒng)被污染了,。
解決方法:用5%的高氯酸水溶液代替原來的自動進樣器的清洗液,,用針筒抽吸約100mL,在樣品瓶中裝入上述清洗液,,用一根塑料阻尼管代替色譜柱,,阻尼管出口處連廢液,不接檢測器,。打開泵,,設(shè)置一個常規(guī)流速。設(shè)置自動進樣程序,,進樣量200μL,分析時間1分鐘,,連續(xù)20次,。結(jié)束后把清洗液換成純水,樣品瓶中裝純水,,依上述同樣操作,,(考慮到進樣量較多,且重復(fù)次數(shù)多,,準(zhǔn)備5個裝適量液體的樣品瓶,,放入樣品盤中,設(shè)置自動進樣程序,,每個瓶連續(xù)抽4次,,5個樣品瓶合計抽20次,避免吸空),。
說明:5%的高氯酸水溶液能夠有效地去除系統(tǒng)中的污垢,,如若無高氯酸,可用甲醇,,純水大進樣量多次清洗,,也能起到同樣的效果。
2.泵壓力突然降至0或很小
現(xiàn)象:在一次連續(xù)分析樣品過程中,,開始分析時系統(tǒng)很正常,,但是到分析第八個樣品時突然發(fā)現(xiàn)泵壓降至0.3Mpa,,而正常時泵壓為5.5Mpa。聞到進樣器中有甲醇味(流動相中甲醇含量很大),。打開進樣器門,,發(fā)現(xiàn)排液閥下面的管子有液體滴出,帶有甲醇味,,停止系統(tǒng),,按shift+9發(fā)現(xiàn)進樣口和rinse口鹽析很厲害。
原因:進樣口被堵,,流動相無法進入色譜柱,,滲漏出來,致使泵壓下降,。
解決方法:根據(jù)自動進樣器常規(guī)維護
3.和4.操作,,更換進樣隔墊和Septumcutout(若沒有備件,進樣口密封圈和rinse口隔墊用純水→甲醇超洗干凈,。)用擦鏡紙沾純水擦干凈進樣口和rinse口旁的鹽析,,再用甲醇擦洗。裝上兩個部件,,打開機器調(diào)試,,無滲漏,泵壓正常即可,。