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使用單細胞 -ICP-MS 法定量癌癥細胞對金納米粒子的攝取率

閱讀:484      發(fā)布時間:2019-03-19
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    癌癥指的是異常細胞不受控制地生長和擴散的一種疾病,。根據(jù)美國癌癥協(xié)會的數(shù)據(jù),癌癥在美國常見的死亡原因中*二,。目前治療癌癥的方法包括手術(shù),、放射療法、免疫療法,、化學(xué)療法等,。盡管這些傳統(tǒng)治療方法可能會提高患者的總體存活率和生活質(zhì)量,但其還存在一些局限性,。例如,,在傳統(tǒng)癌癥化療中,小分子癌癥療法以非特異性的方式將小分子藥物分散至整個人體內(nèi),。結(jié)果是,,這些藥物不僅殺死了癌細胞,還破壞了機體的健康細胞,,給癌癥患者帶來嚴(yán)重的副作用,, 因此迫切需要能夠針對病變細胞的新療法。

    納米粒子(NP)在過去的 20 年里引起了極大的關(guān)注,,原因在于,,其為藥物遞送提供了具有吸引力的優(yōu)勢,,從而解決了傳統(tǒng)化療的局限性,。3 可將納米粒子設(shè)計為同時攜帶藥物和成像探針的模式,以便同時檢測和治療癌癥,。還可將其設(shè)計為專門針對機體病變組織和細胞的模式,。很多基于納米粒子的癌癥療法已獲準(zhǔn)在臨床上使用和 / 或目前正在開發(fā)中。與傳統(tǒng)小分子藥物相比,,合理設(shè)計的納米粒子具備以下優(yōu)勢的可行性:(i)延長體內(nèi)循環(huán)時間,;(ii)減少非特異性細胞攝取、意外偏離目標(biāo)和副作用,;以及(iii)通過特定癌細胞靶向部分來提高細胞相互作用,。癌癥治療的療效與藥物量有關(guān),該藥物量與每個單獨癌細胞相互作用,。用于測定藥物暴露量的傳統(tǒng)藥物研究技術(shù),,例如,傳統(tǒng)的電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS),,一直局限于細胞整體測量方法,。然而,這些測試方法需要將給定細胞群均質(zhì)化,以便進行定量分析,。需要假設(shè)該細胞群中的所有細胞均相似,,并假設(shè)這些細胞與相同數(shù)量的藥物相互作用。相反,,研究表明,,細胞群屬于異質(zhì), 甚至來自同一細胞群和細胞系的細胞也存在差異,。 例如,,基因表達數(shù)據(jù)以均勻化細胞群為基礎(chǔ),將存在由于使用平均值數(shù)據(jù)結(jié)果,,無法考量在單個細胞內(nèi)發(fā)生的少量卻關(guān)鍵的變化,而得出錯誤結(jié)論的可能性,。單個細胞可能在大小,、蛋白質(zhì)水平、表達核糖核酸(RNA)轉(zhuǎn)錄上存在顯著差異,。這些差異是在討論癌癥研究,、干細胞生物學(xué),、免疫學(xué),、發(fā)展生物學(xué)、神經(jīng)學(xué)等以前無法解決的問題時,,是非常關(guān)鍵的。

    為解決分批處理細胞的試驗方法造成的這些局限性,,研究人員研發(fā)單細胞(SC)ICP-MS 方法,。該技術(shù)允許快速、可靠地分析大量單個細胞,,而非分析作為整體或僅含少量細胞的細胞群,。研究表明,通過采用 SC-ICP-MS 方法,, 能夠測定細胞內(nèi)金屬成分,、定量分析金屬及金屬摻雜藥物、納米粒子的細胞攝取率,。


    在本文中,,我們證明 了,在單個細胞基礎(chǔ)上通過 PerkinElmer 的 NexION®2000 單細胞 ICP-MS 解決方案來量化癌細胞的金納米粒子攝取量。該技術(shù)能夠準(zhǔn)確定量出含金納米粒子(AuNP)的細胞數(shù),,還能夠分析每單個癌細胞中的 AuNP 數(shù),給出細胞群的攝取分布,。

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