固相萃取小柱是從層析柱發(fā)展而來的一種用于萃取,、分離、濃縮的樣品前處理裝置,。主要應(yīng)用于各種食品,、農(nóng)畜產(chǎn)品、環(huán)境樣品以及生物樣品中目標(biāo)化合物的樣品前處理,。固相萃取技術(shù)已經(jīng)被廣泛地使用在許多國標(biāo)（GB/T）以及行業(yè)分析標(biāo)準(zhǔn)中,。
它的容量是指固相萃取柱填料的吸附量。對于以硅膠為基質(zhì)的固相萃取柱,，其容量一般在1~5 mg/100 mg,，也就是柱容量是填料質(zhì)量的1%~5%,。而鍵合硅膠離子交換吸附劑填料的容量以meq/g表示，即每克填料的容量為X毫克當(dāng)量,。這類填料的容量通常在0.5~1.5 meq/g,。
固相萃取小柱原理如下：
1、選擇SPE固相萃取小柱或?yàn)V膜：首先應(yīng)根據(jù)待測物的理化性質(zhì)和樣品基質(zhì),，選擇對待測物有較強(qiáng)保留能力的固定相,。若待測物帶負(fù)電荷，可用陰離子交換填料,，反之則用陽離子交換填料,。若為中性待測物，可用反相填料萃取,。SPE小柱或?yàn)V膜的大小與規(guī)格應(yīng)視樣品中待測物的濃度大小而定,。對于濃度較低的體內(nèi)樣品，一般應(yīng)選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品,。
2,、活化：萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5～10ml溶劑沖洗濾膜。一般可先用甲醇等水溶性有機(jī)溶劑沖洗填料,，因?yàn)榧状寄軡櫇裎絼┍砻?，并滲透到非極性的硅膠鍵合相中，使硅膠更容易被水潤濕,，之后再加入水或緩沖液沖洗,。加樣前，應(yīng)使SPE填料保持濕潤,，如果填料干燥會(huì)降低樣品保固相萃取技術(shù)方法固相萃取技術(shù)方法留值,；而各小柱的干燥程度不一，則會(huì)影響回收率的重現(xiàn)性,。
3,、上樣：一般可采取以下措施：
①用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié),，使pH<3或pH>9,，離心取上層液萃取,；
?、谟眉状肌⒁译娴瘸恋淼鞍踪|(zhì)后取上清液,，以水或緩沖液稀釋后萃取,；
?、塾盟峄驘o機(jī)鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液，調(diào)節(jié)pH值后萃取,；
?、艹?5min后加入水、緩沖液,，取上清液萃取,。尿液樣品中的藥物濃度較高，加樣前先用水或緩沖液稀釋,，必要時(shí)可用酸,、堿水解反應(yīng)破壞藥物與蛋白質(zhì)的結(jié)合，然后萃取,。流速應(yīng)控制為1ml/min,，流速快不利于待測物與固定相結(jié)合。
4,、淋洗,，反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液，可在清洗液中加入少量有機(jī)溶劑,、無機(jī)鹽或調(diào)節(jié)pH值,。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過一個(gè)小柱的容積，而SPE濾膜為5～10ml,。
5,、洗脫待測物，應(yīng)選用5～10ml離子強(qiáng)度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑,。若需較高靈敏度,，則可先將洗脫液揮干后，再用流動(dòng)相重組殘留物后進(jìn)樣,。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水,，可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積,、較弱的洗脫液洗下待測物,，再用極性較強(qiáng)的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。若待測物可電離,，可調(diào)節(jié)pH值,，抑制樣品離子化，以增強(qiáng)待測物在反相SPE填料中的保留,，洗脫時(shí)調(diào)節(jié)pH值使其離子化并用較弱的溶劑洗脫,，收集洗脫液后再調(diào)節(jié)pH值使其在HPLC分析中達(dá)到*分離效果。在洗脫過程中應(yīng)減慢流速,，用兩次小體積洗脫代替一次大體積洗脫,，回收率更高,。
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