快速液相色譜儀分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等,。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,,可在二者之間加一連接管),內徑為2~5mm,,由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成).固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或硅膠構成,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去),、多孔性(孔徑可達1000)和比表面積大的特點,,加之其表面經(jīng)過機械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),或者用化學法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基,、季胺基,、羥甲基、苯基,、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物,。因此,這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性,。例如,,在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來,。
另外,,固定相基質粒小,柱床極易達到均勻,、致密狀態(tài),,極易降低渦流擴散效應?;|粒度小,,微孔淺,,樣品在微孔區(qū)內傳質短。這些對縮小譜帶寬度,、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析,基質粒度小,,塔板理論數(shù)N就越大,。這也進一步基質粒度小,會提高分辨率的道理,。

快速液相色譜儀重復性誤差故障處理:
1,、進樣閥漏液;
2,、加樣針不到位,;
3、液量不足,。
處理對于種情況更換進樣閥墊圈,;對于第二種情況保證加樣針插到底,樣品溶液后須快速,、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉換到INJECT狀態(tài),,以保證進樣量的準確。日常工作中,,快速液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要,,注意不要讓空氣進入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,儲液器內的溶液如長時間未用應清洗儲液器并更換溶液,,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,,防止無機鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,,任何樣品都要盡可能地去除雜質,,*溶解,盡量減少對色譜柱的污染,,以延長色譜柱的使用壽命,,同時避免過濃的樣品溶液,以免殘留液在進樣閥內析出固體引起堵塞,;色譜柱作好標記,,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
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