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進(jìn)口液相色譜儀一般情況下的使用技巧
造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染,，或柱頭填料塌陷導(dǎo)致的,。
進(jìn)口液相色譜儀對于*種情況,，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗,，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗,，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上,。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況,。
對于第二種情況,，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷,。去除硬結(jié)部分(污染的填料),，裝入新填料，滴一滴甲醇,，填料下陷,，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,，再填平,，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次,，直至裝滿填平,。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料,，擰緊柱頭,，用純甲醇沖洗30分鐘以上。
對進(jìn)口液相色譜儀的要求
1.流動相必須用HPLC級的試劑,，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細(xì)的膜過濾),。
2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用,。
3.不能用純乙腈作為流動相,，這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。
4.使用緩沖溶液時,，做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子,。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上,。
5.長時間不用儀器,，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機(jī)相(如,，甲醇等),，因?yàn)椋兯组L霉,。
6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器,。
7.C18柱不能進(jìn)蛋白樣品，血樣,、生物樣品,。
8.堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,，清洗方法：
?、僖援惐甲魅軇_洗；
?、诜旁诋惐贾虚g用超聲波清洗,；
③用10％稀硝酸清洗,；
9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),，重現(xiàn)性差，所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡,。
10.如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時,，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進(jìn)行流動相的清洗。
11.進(jìn)口液相色譜儀要注意柱子的pH值范圍,，不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品,，特別是堿性樣品。
12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,，然后插入新的流動相中,。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。