液相色譜儀是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法,,液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶,、輸液泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器和記錄器組成,,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整,。
液相色譜儀的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),;進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。液相色譜儀應(yīng)用非常廣泛,,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。
不同組分在液相色譜儀過程中的分離情況,首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù),、吸附能力,、親和力等是否有差異,這是熱力學(xué)平衡問題,,也是分離的首要條件,。其次,當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動(dòng)時(shí),,譜帶隨柱長展寬,,分離情況與兩相之間的擴(kuò)散系數(shù)、固定相粒度的大小,、柱的填充情況以及流動(dòng)相的流速等有關(guān),。所以分離zui終效果則是熱力學(xué)與動(dòng)力學(xué)兩方面的綜合效益。
使用液相色譜儀時(shí),,液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,,通過壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,,通過檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),zui后通過分析比對(duì)這些信號(hào)來判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì),。液相色譜作為一種重要的分析方法,,廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和微粒固定相,,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā),、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物,。
液相色譜儀分析的流程:由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng),,然后輸出,,經(jīng)流量與壓力測(cè)量之后,導(dǎo)入進(jìn)樣器,。被測(cè)物由進(jìn)樣器注入,,并隨流動(dòng)相通過色譜柱,在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測(cè)器,,檢測(cè)信號(hào)由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理,,并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶,。遇到復(fù)雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫,。這和氣相色譜的程序升溫類似,不同的是氣相色譜改變溫度,,而液相色譜儀改變的是流動(dòng)相極性,,使樣品各組分在*條件下得以分離。