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東京理化EYELA在普洱茶茶褐素分離研究的應(yīng)用
為了了解解普洱茶茶褐素的組成,,對(duì)從普洱茶中提取的茶褐素進(jìn)行了分離。通過(guò)比較不同樹(shù)脂對(duì)茶褐素的吸附與解吸能力,,選擇AB-8 大孔樹(shù)脂對(duì)普洱茶茶褐素進(jìn)行分離,得到TBsP1 和TBsP2 兩個(gè)組分; 進(jìn)一步利用DEAE-52 纖維素柱對(duì)TBsP1 組分進(jìn)行分離,,得到6 個(gè)組分; 對(duì)茶褐素組分TBsP1,、TBsP2 以及TBsP1 分得到的6 個(gè)組分的總糖、總酚和蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行了分析,,并進(jìn)一步對(duì)各組分的單糖組成進(jìn)行了分析,。
普洱茶是我國(guó)*的,采用云南大葉種曬青毛茶經(jīng)渥堆發(fā)酵制成,,渥堆發(fā)酵過(guò)程中,,茶多酚在微生物作用及濕熱作用下被氧化成茶黃素、茶紅素,,茶黃素和茶紅素進(jìn)一步氧化聚合,,并結(jié)合多糖、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等化合物形成茶褐素,。茶褐素能溶于水而不溶于乙酸乙酯和正丁醇,是一類(lèi)十分復(fù)雜的化合物,,具有抗癌,、減肥降脂、抗疲勞等活性功能,,化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)有待探明,。
目前關(guān)于茶黃素的研究為深入,已制備得到多種茶黃素單體,,茶紅素的研究也取得一定進(jìn)展,,茶褐素則由于其組成,、結(jié)構(gòu)復(fù)雜,極性很大,,分離純化的難度高,,其研究進(jìn)展緩慢。等利用原子力顯微鏡對(duì)不同分子量的茶褐素進(jìn)行觀察,,發(fā)現(xiàn)不同分子量的茶褐素粒子形貌并不均一,。利用硅膠層析對(duì)茶褐素進(jìn)行分離,發(fā)現(xiàn)茶褐素為多羥基物質(zhì),,含有烷基,、羧基及苯環(huán),主要的糖單位為葡萄糖,。等利用sephadex-LH20 對(duì)茶褐素進(jìn)行分級(jí),,得到六個(gè)級(jí)分,這些級(jí)分由兒茶素以外的多酚,、蛋白質(zhì)及多糖組成,,但是各組分中總酚、總糖和蛋白質(zhì)含量不同,。
儀器:N-1100 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀日本東京理化; UV5200
本文通過(guò)利用AB-8 樹(shù)脂將茶褐素分離成兩種不同的極性的組分,,兩個(gè)組分總糖、總酚,、蛋白質(zhì)含量不同,,TBsP1 中多糖含量較高,TBsP2 中總酚含量高,。兩組分的單糖組成上也有區(qū)別尤其是GalA 和Glc 的摩爾百分比差異較大,。TBs-P1 組分經(jīng)DEAE-52 分離后得到六種不同性質(zhì)的組分,各個(gè)組分總糖,、總酚和蛋白質(zhì)含量均有區(qū)別,,說(shuō)明經(jīng)過(guò)AB - 8 樹(shù)脂和DEAE-52 樹(shù)脂分步層析分離,可以將不同性質(zhì)的茶褐素組分進(jìn)行分離,。不同組分中多糖,、多酚和蛋白質(zhì)的結(jié)合程度也有所不同。茶褐素的主要分離組分單糖組成相似,,各種單糖的摩爾百分比有差別,,但與曬青毛茶相比差異較大,說(shuō)明普洱茶發(fā)酵過(guò)程中,,原料的糖類(lèi)物質(zhì)經(jīng)微生物作用發(fā)生變化,,并與多酚和蛋白質(zhì)結(jié)合形成了茶褐素。有關(guān)普洱茶發(fā)酵過(guò)程中茶褐素形成方式,、單糖組成的變化,,各組分的結(jié)構(gòu)特定,、生理活性等還有待研究。
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