低溫保存,、冷凍干燥對程序降溫的要求

低溫一般是指0℃左右,，深低溫一般指低于-80℃以下，在低溫環(huán)境中,，生物體的新陳代謝會隨著溫度的降低而延緩,。在0℃以上時，這種延緩是可逆的,，隨著溫度升高,，新陳代謝還回逐步恢復(fù)，但降至0℃以下時,，這種延緩會受到不可逆的損傷,。因?yàn)樾玛惔x一般發(fā)生在水溶液或和水溶液之上進(jìn)行，而冰點(diǎn)以下的水會形成硬度較高的冰晶,，并且會使細(xì)胞內(nèi)的水分丟失而形成細(xì)胞脫水,。

所以不同的細(xì)胞要求利用不同的降溫程序，一些復(fù)雜的細(xì)胞還需要多段降溫,。降溫方法多樣,，例如利用冰箱進(jìn)行兩步法降溫,，和利用液氮容器內(nèi)氣象區(qū)的溫度梯度手控降溫。

在設(shè)計和選用降溫儀時需要全面考慮到產(chǎn)品需求,，例如數(shù)量,、形狀等，同時需要考慮降溫儀的降溫速率,、溫控范圍等,，另外還要考慮到經(jīng)濟(jì)性和實(shí)用性，綜合評價下選用方案,。

（1）工作溫度范圍：一般情況下降溫儀的溫控范圍是室溫至-60℃,，溫度則根據(jù)實(shí)際工作需要決定。

（2）溫控速率：經(jīng)過數(shù)十年的反復(fù)研究,，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)越低的降溫速率越能實(shí)現(xiàn)對于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞降溫需求,，而所謂的“超慢速冷卻”則需要降溫儀能夠達(dá)到0.001℃/min的速度。另外個別需要急速冷凍的工作需要,，則可以直接選擇液氮冷凍的方式進(jìn)行,。

（3）控制精度：降溫過程中的控制精度包括兩個方面：降溫速率的精度控制和溫度值的精度控制。實(shí)踐中認(rèn)為誤差在5%之內(nèi)是可以被接受的,。嚴(yán)格來說,，一般控制在±0.2℃的精度控制內(nèi)是可以被允許的。

（4）冷源的選擇：在實(shí)際工作中，一般情況下使用價格較低的固態(tài)二氧化碳和液氮用來作為冷源,。當(dāng)華點(diǎn)高于-78℃時,，一般選用固態(tài)二氧化碳，而需要更低溫度時則選用液氮,，目前大多數(shù)降溫儀選用的冷源是液氮,。