ELSD蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是通用型檢測(cè)器,,可以檢測(cè)沒(méi)有紫外吸收的有機(jī)物質(zhì),,如人參皂苷、黃芪甲苷等,。不同于其他檢測(cè)器,,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線,使得分辨率更好,、分離速度更快,。另外,因?yàn)镋LSD的響應(yīng)不依賴(lài)于樣品的光學(xué)特性,,所以ELSD檢測(cè)時(shí)樣品不要求帶有發(fā)色團(tuán)或熒光基團(tuán),。
步驟1:霧化
經(jīng)HPLC分離的柱洗脫液進(jìn)入霧化器,在此與穩(wěn)定的霧化氣體(一般為氮?dú)猓┗旌闲纬蓺馊苣z,。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,,液滴越大則散射的光越多,,從而提高了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā),。每種方法均存在產(chǎn)生最佳信號(hào)噪音比率的優(yōu)化氣體流量,。流動(dòng)相流速越低要求適當(dāng)霧化的氣體流量也越低。用內(nèi)徑為2.1mm的微徑柱代替內(nèi)徑為4.6mm標(biāo)準(zhǔn)型分析柱,,能大大降低流動(dòng)相流速,,因而提高分析的靈敏度。
步驟2:蒸發(fā)
氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā),。為特定應(yīng)用設(shè)置適當(dāng)?shù)钠乒軠囟?,取決于流動(dòng)相組成和流速,,以及樣品的揮發(fā)性。高有機(jī)含量流動(dòng)相比高含水量流動(dòng)相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低,。流動(dòng)相流速越低比流動(dòng)相流速越高要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低,。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得最佳靈敏度,。最佳溫度需要通過(guò)觀察各溫度時(shí)的信號(hào)噪音比率來(lái)確定,。
步驟3:檢測(cè)
懸浮于流動(dòng)相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進(jìn)入到光散射檢測(cè)池。在檢測(cè)池中,,樣品顆粒散射激光光源發(fā)出的光而蒸發(fā)的流動(dòng)相不散射,。散射光被硅光電二極管檢測(cè),產(chǎn)生電信號(hào)輸送模擬信號(hào)輸出端口,,被用于模擬輸出的數(shù)據(jù)采集,。