目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 細菌鞭毛蛋白純化試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20次 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-1893 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Bacterial Flagellin Protein Purification Kit |
| 保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介：
細菌鞭毛蛋白可以作為疫苗佐劑,，具有重要的應(yīng)用價值,。傳統(tǒng)的純化細菌鞭毛蛋白的 方法多需要使用超速離心或者層析交換，步驟非常繁瑣,，使用不便,，為此本公司開發(fā)了不 需要超速離心和層析交換的細菌鞭毛蛋白快速純化試劑盒。
產(chǎn)品特點：
1.只有洗滌和沉淀兩步,，簡單快捷,。
2.所得細菌鞭毛蛋白純度高，完整性好,。
3.回收效率高,，一般能得到相當于總蛋白量 6%的鞭毛蛋白。
4.可用于Escherichiacoli,，Salmonellatyphimurium,，Salmonellatyphi，
Citrobacterfreundii等細菌,。
5.本產(chǎn)品需要冷凍高速離心機,。
6.本產(chǎn)品足夠 20 次細菌鞭毛蛋白純化，每次可以處理 1 L 飽和菌液,。
7.細菌鞭毛蛋白純化試劑盒只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù)：
本產(chǎn)品由一個扁盒和一個大立盒組成，大立盒包裝,，常溫運輸和保存
成分規(guī)格包裝
10×細菌鞭毛蛋白純化洗滌液250 mL250 mL 本色瓶
使用手冊1 份1 份
本產(chǎn)品由一個扁盒和一個大立盒組成,，大扁盒包裝，常溫運輸和保存
成分規(guī)格包裝
細菌鞭毛蛋白純化沉淀劑250 g×2500 mL 干粉瓶
使用手冊1 份1 份
運輸及保存
常溫運輸和保存,，有效期一年,。
自備試劑
超純水、PBS 緩沖液（pH 7.4）,，透析耗材,。
使用方法：
1.實驗前取將適量的10×細菌鞭毛蛋白洗滌液用自備的超純水稀釋10 倍后得到1×細菌鞭毛蛋白洗滌液,，放冰上待用。
2.收集 1 L 過夜培養(yǎng)的細菌飽和培養(yǎng)液（OD600 在 0.6 左右即可）,，5,000×g 室溫離心 10 分鐘后棄上清,。
3.在細菌沉淀中加入 200 mL 自備的 PBS 緩沖液（pH 7.4），充分混勻得到細菌重懸液,。
4.5,000×g 室溫離心 10 分鐘,，小心棄除上清。
5.重復(fù) 3-4 步一次,。
6.在細菌沉淀中加入 50 mL 1×細菌鞭毛蛋白洗滌液,，充分混勻得到細菌重懸液。
7.將細菌懸浮液轉(zhuǎn)移到 100 mL 燒杯中（或 100 mL 平底塑料平中）并放入磁力攪拌子,，再將 100 mL 燒杯放到一個大燒杯（如 2 L 燒杯）中間,，周邊入碎冰固定小燒杯，然后將裝有小燒杯的大燒杯放在磁力攪拌器上攪拌 30 分鐘,。
8.取出攪拌子,，將細菌重懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，10,000×g 離心 20 分鐘,，小心收集含有細菌鞭毛蛋白的上清液,。
9.將上清液轉(zhuǎn)移到一個 100 mL 干凈燒杯中并放入磁力攪拌子，再將 100 mL 燒杯放到一個大燒杯（如 2 L 燒杯）中間,，周邊入碎冰固定小燒杯,，然后將裝有小燒杯的大燒杯放在磁力攪拌器上緩慢攪拌。攪拌中加入細菌鞭毛蛋白純化沉淀劑 23.6 g,，待沉淀劑溶解后停止攪拌,，靜置 45 分鐘。期間細菌鞭毛蛋白將形成沉淀,。
10.取出攪拌子,，將溶液轉(zhuǎn)移到干凈離心管中，4℃下 10,000×g 離心 10 分鐘,。
11.小心棄除上清,，所得沉淀為細菌鞭毛蛋白。
12.由于所得細菌鞭毛蛋白含鹽,，所以用戶需要采用過柱除鹽法或透析除鹽法除鹽,。由于 細菌鞭毛蛋白分子量在 15-40 Kd，所以需要據(jù)此選擇合適截留孔徑的透析袋,，在合適透析液（根據(jù)后續(xù)實驗確定）中進行過夜透析,。本試劑盒不含相關(guān)試劑。
選擇我們的細菌鞭毛蛋白純化試劑盒，就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航,！
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