日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

真核細(xì)胞的 RNA 存在于三個(gè)部位，第一個(gè)部位是細(xì)胞核,，主要是剛轉(zhuǎn)錄出來(lái)的各種RNA 前體,。第二個(gè)部位是細(xì)胞漿，主要是用做翻譯模板的成熟 mRNA,、rRNA,、tRNA 和miRNA 等。第三個(gè)部位是線粒體和葉綠體這些細(xì)胞器,，它們有自己獨(dú)立的 RNA,。在某些研究中，需要分部位純化 RNA,。本產(chǎn)品就是專門滿足此類需求的試劑盒,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.采用專用膜裂解液，依次分離細(xì)胞漿,、細(xì)胞器裂解液和細(xì)胞核三個(gè)組分,，分別用于提  取對(duì)應(yīng)的 RNA,。

2.起始材料為培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，如 HEK293,、HeLa 和 HT1080,，但不適用于實(shí)體組織和有細(xì)胞壁的真菌細(xì)胞和植物細(xì)胞。

3.基于異硫氰酸胍的沉淀法提取,，RNA 回收率高,，基因組 DNA 污染少。

4.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR,、Northern 雜交,、cDNA 合成等實(shí)驗(yàn)

5.性價(jià)比高于進(jìn)口的柱式 RNA 提取產(chǎn)品。

6.本產(chǎn)品足夠 50 次細(xì)胞漿 RNA 純化,、50 次細(xì)胞器 RNA 純化和 50 次細(xì)胞核 RNA 純化,。一次提取需要 1E6-1E7 個(gè)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞。

7.細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞器RNA純化試劑盒只能用于科研,。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

細(xì)胞膜專用裂解液20 mL30 mL 本色瓶

細(xì)胞器專用裂解液20 mL30 mL 本色瓶

CI 混合液50 mL60 mL 棕玻瓶

核酸沉淀劑 B 型150 mL250 mL 本色瓶

RNA 洗脫液10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

成分編號(hào)規(guī)格包裝

動(dòng)物 RNA 提取液250 mL250 mL 棕玻瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存,，動(dòng)物 RNA 提取液需要放 4℃長(zhǎng)期保存，有效期一年,。

自備試劑

PBS,、胰-酶溶液（0.25% 胰-酶、0.9 mM EDTA）,、75%乙醇,。

使用方法：

一、細(xì)胞的準(zhǔn)備（本試劑盒不含本步相關(guān)試劑）

1.在直徑 10 cm 的培養(yǎng)皿（面積為 55 平方厘米）中培養(yǎng)貼壁細(xì)胞到 80%融合度,，去掉培養(yǎng)基,，用常溫自備 PBS 洗滌貼壁細(xì)胞。

2.加入 0.8 mL 胰-酶溶液處理（0.25% 胰-酶,、0.9 mM EDTA）37℃保溫直到細(xì)胞分散（至少 2 分鐘）,。

3.加入 5 mL 含 10%胎牛血清的培養(yǎng)基終止胰-酶消化，然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中,。

4.4℃ 500×g 離心 10 分鐘,，小心去上清液。

5.加入 0.5 mL 預(yù)冷 PBS 重懸細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到 1.5 mL RNase-free 離心管中,。

6.4℃ 500×g 離心 10 分鐘,，小心去上清液。

二,、細(xì)胞漿裂解樣本的準(zhǔn)備

7.在細(xì)胞沉淀中加入 400 ?L 預(yù)冷的細(xì)胞膜專用裂解液。

8.在 4℃冷室的脫色搖床上端對(duì)端搖晃 10 分鐘以確保細(xì)胞膜完-全裂解,。9. 4℃ 2000×g 離心 10 分鐘,。

10.小心將上清液均分到兩個(gè) 1.5 mL RNase-free 離心管中,，分別加入 1 mL 動(dòng)物 RNA提取液，渦旋震蕩 30 秒,，標(biāo)記為細(xì)胞漿 RNA,，室溫放置待用（跟后面的細(xì)胞器裂解樣本和細(xì)胞核裂解樣本一起純化）。

三,、細(xì)胞器裂解樣本的準(zhǔn)備

11.在上步的沉淀（含細(xì)胞核和細(xì)胞器）中加入 400 ?L 預(yù)冷的細(xì)胞器膜專用裂解液,。

12.在 4℃或冰上放置 30 分鐘以確保細(xì)胞器膜完-全裂解。13. 4℃ 7000×g 離心 10 分鐘,。

14.小心將上清液（細(xì)胞器裂解液）均分到兩個(gè) 1.5 mL RNase-free 離心管中,，分別加入 1 mL 動(dòng)物 RNA 提取液，渦旋震蕩 30 秒,，標(biāo)記為細(xì)胞器 RNA,，室溫放置待用（跟后面的細(xì)胞核裂解樣本一起純化）。

四,、細(xì)胞核裂解樣本的準(zhǔn)備

15.在上步的沉淀（含細(xì)胞核）中加入 1 mL 動(dòng)物 RNA 提取液,，渦旋震蕩 30 秒，室溫放置 10 分鐘,。離心管標(biāo)記為細(xì)胞核 RNA,。

16.跟上面的兩個(gè)樣本共 5 管一起進(jìn)入下一步操作。五,、RNA 純化

17.在裝有裂解物-動(dòng)物 RNA 提取液混合物的 5 個(gè)離心管中分別加入 0.2 mL CI 混合液,，

振蕩器上充分振蕩混均 30 秒。注意：一定要把官底的溶液震蕩起來(lái),，否則只是液面的振動(dòng),。

18.14000×g 室溫離心 3 分鐘。

19.將上清液（約 0.6 mL）轉(zhuǎn)移到另一干凈的 1.5 mL 塑料離心管中,。下層有機(jī)相（藍(lán)色）和中間層含有 DNA 和蛋白質(zhì),，避免觸及，否則將產(chǎn)生蛋白質(zhì)和 DNA 污染,。為保險(xiǎn)起見(jiàn),，可以留下 50-100 ?L 上清液不取。

20.在上清液中加入等體積的核酸沉淀液 B 型,，振蕩器上振蕩 30 秒混勻,。

21.14000×g 室溫離心 5 分鐘，離心底的側(cè)面將形成 RNA 沉淀,。

22.小心吸棄上清液,，注意不要吸棄 RNA 沉淀。

23.在含 RNA 沉淀的離心管中加入 1 mL 自備的 75%乙醇,，振蕩混勻 30 秒,。

24.14000×g 室溫離心 3 分鐘,。

25.小心吸棄上清液，注意不要吸棄 RNA 沉淀,。

26.短暫快速離心,，用移液槍小心吸棄殘留乙醇(約 50 ?L)。注意不要吸棄 RNA 沉淀,。此步十分重要,，否則殘留的乙醇會(huì)影響 RNA 的后續(xù)使用。

27.室溫放 1-2 分鐘后立即加入 50-100 ?L RNA 洗脫液使 RNA 沉淀溶解,。千萬(wàn)不要用真空離心法使 RNA 沉淀過(guò)于干燥,，否則 RNA 將變得十分難溶。RNA 樣品可以立即

用于電泳,、OD 測(cè)定,、RT-PCR 或存放于-80℃待用。

選擇我們的細(xì)胞核細(xì)胞漿細(xì)胞器RNA純化試劑盒,，就是選擇精準(zhǔn),、高效、可靠的檢測(cè)方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！