目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 昆蟲DNA純化試劑盒(過(guò)柱法)
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更新時(shí)間:2025-04-28 16:44:49瀏覽次數(shù):44評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號(hào) | XY-D-1861 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Column Insect DNA Purification Kit |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品是專門用于從昆蟲,、節(jié)肢動(dòng)物,、蛔蟲、扁形蟲和一些富含多糖的動(dòng)物組織中提取基因組 DNA 的試劑盒,。其原理是基于去垢劑在適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度條件下,,特異地跟基因組 DNA 結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜離心吸附法進(jìn)行進(jìn)一步純化得到 DNA,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.適用于用常規(guī)方法難以提取的,、各種富含多糖的動(dòng)物,包括昆蟲,、節(jié)肢動(dòng)物,、蛔蟲和扁形蟲等。
2.除新鮮樣品外,,還適合于各種保存狀態(tài)的樣品,,包括冷凍的樣品、用乙醇保存的樣品和福爾馬林保存的樣品,。
3.提取到的基因組 DNA 完整性,,長(zhǎng)度一般在 20-50 Kb。
4.DNA 純凈,,OD260/280 一般都在 1.8 左右,,可直接用于 PCR、酶切和雜交等,。
5.操作簡(jiǎn)單,,整個(gè)過(guò)程約 30 分鐘。
6.安全無(wú)毒,,本試劑盒對(duì)人體無(wú)毒,,無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。
7.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取,,每次可以處理 0.1-0.3 g 昆蟲樣品,。
8.昆蟲DNA純化試劑盒(過(guò)柱法)只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù):
成分規(guī)格包裝材料
昆蟲DNA 純化試劑溶液A50 mL60 mL 本色瓶
昆蟲DNA 純化試劑溶液 B50 mL60 mL 本色瓶
昆蟲DNA 純化試劑溶液 C50 mL60 mL 本色瓶
離心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
DNA 洗脫液(基因組純化專用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手冊(cè)1 份1 份
運(yùn)輸及保存
常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年,。
自備試劑
氯仿,。
相關(guān)資料:
1.稱取 0.1-0.3 g 昆蟲樣品轉(zhuǎn)移到塑料研缽中,液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5 mL 塑料離心管中,。
注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽,,因?yàn)?DNA 會(huì)吸附在表面,影響得率,。
2.在離心管中加入 1 mL 65℃預(yù)熱的昆蟲 DNA 純化試劑溶液 A 并用移液槍頭充分吹打混勻(如果昆蟲DNA純化試劑溶液A有沉淀,,需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。
3.65℃保溫 5-30 分鐘,,其間最好吹打混勻 2-3 次,。
4. 12,000-15,000×g 室溫離心 3 分鐘。
5.將不超過(guò) 0.75 mL 的上清轉(zhuǎn)移到新離心管中,。有時(shí)候上清液中還會(huì)有少量細(xì)小懸浮物,,但對(duì)后續(xù)操作沒(méi)有影響,不必進(jìn)行特殊處理,。
6.在上清液中加入等體積的昆蟲DNA 純化試劑溶液 B,,上下顛倒 30 秒充分混勻,溶液將呈白色混濁,。
7.將其置于冰浴中放置 5-10 分鐘。
8.12,000-15,000×g 室溫離心 3 分鐘,,轉(zhuǎn)移上清到新的 1.5 mL 塑料離心管中,。
9.加入 0.2mL 的氯仿(自備),震蕩器上充分振蕩 30 秒混勻,。
10.12,000-15,000×g 室溫離心 3 分鐘,,兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉(zhuǎn)移上清到新 1.5-5 mL 塑料離心管中,。注意:由于下一步要加 1.5 倍體積的昆蟲DNA 純化試劑溶液 C,,所以新的離心管的體積要足夠大。
11.加入 1.5 倍體積的昆蟲DNA 純化試劑溶液 C,,上下顛倒 30 秒混勻,,然后分多次的將混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。
12.每次轉(zhuǎn)移 0.7-0.8 mL 混合液后,,室溫放置 5-10 分鐘,。13. 12,000-15,000×g 室溫 1 分鐘,棄穿透液,。
14.對(duì)需要多次上柱的樣品,,可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中,重復(fù)第 12-14 步的操作。
15.將 0.7 mL 通用洗柱液加入離心柱,,室溫離心 1 分鐘,,棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液,,12,000-15,000×g 離心半分鐘(此步為第二次洗滌),。
17.空甩 1 分鐘去除殘留液體。
18.將離心柱放置在一新的 1.5 mL 塑料離心管中,,加入 30-100 μL DNA 洗脫液 2.0,。
19.室溫放置 5 分鐘后離心 1 分鐘,管底即為昆蟲 DNA 溶液,,可立即使用,,也可長(zhǎng)期保存在-20℃。
20.可以重復(fù)上步一次,,以洗脫更多的 DNA,。
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