目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 無酚無氯仿植物RNA-提取試劑盒（過柱法）
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-1857 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Phenol/Chloroform-free Plant RNA Purification Kit |
| 保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介：
本產(chǎn)品是在本公司過柱法植物 RNA 提取試劑盒的基礎(chǔ)上經(jīng)過配方和流程優(yōu)化得到的無酚無氯仿升級產(chǎn)品，它結(jié)合了植物 RNA 提取試劑盒的高效性,、快捷性以及無氯仿處理的安全性,。
產(chǎn)品特點：
1.免酚和氯仿處理，操作安全可靠,。
2.簡單快速,，處理一個樣品只需要約十分鐘。
3.RNA 純度更高,，平均OD260/280 一般都在 2.0 左右,，能夠有效去除大多數(shù)植物中的多糖污染。
4.目前已測試過上百種植物,。
5.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR,、Northern 雜交和 cDNA 合成等實驗。
6.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取,，每次可以處理 50-200 mg 植物材料,。
7.性價比高于進口的柱式植物 RNA 提取產(chǎn)品。
8.無酚無氯仿植物RNA-提取試劑盒（過柱法）只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù)：
成分規(guī)格包裝
無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液A50 mL60 mL 本色瓶
無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 B50 mL60 mL 本色瓶
離心吸附柱（寬口）30 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
RNA 洗脫液10 mL10 mL 本色瓶
使用手冊1 份無
運輸及保存
常溫運輸及保存,，有效期一年。
自備試劑
無
使用方法：
注意：如果無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 A（以下簡稱溶液 A）低溫下可能會產(chǎn)生沉淀,，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用,。
1.估算組織細胞的用量。每次微量提取一般需要 50-100 mg 植物葉片、或 30-50 mg 植物種子,、或 100-200 mg 植物果實,。不能多加，否則容易堵柱,。無氯仿提取處理的量比常規(guī)的加氯仿處理量要少一倍,，否則非常容易堵柱，但是否堵柱又取決于植物組織的多糖多酚的濃度,。
2.勻漿法裂解樣品:先將新鮮植物組織-剪切成小塊放入 10-15 mL 塑料離心管中,， 加入 1 mL 溶液A，然后用勻漿器勻漿 5-20 秒,。勻漿時會產(chǎn)生泡沫,，但不影響提取效果。
3.或液氮研磨法裂解樣品（適用于復(fù)雜,，易降解樣品）：取適量新鮮植物組織放入含液氮的研缽中,，迅速將組織研磨成粉末后，將粉末轉(zhuǎn)移到合適的塑料離心管中,， 加入 1 mL 溶液 A,，立即劇烈振蕩 20 秒，充分混勻,。
4.將勻漿物或液氮研磨物轉(zhuǎn)移至干凈的 1.5mL 塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細胞碎片)。有的植物組織(比如果實)含有大量水份,，勻漿液會多于 1 mL,，轉(zhuǎn)移時也只取 1 mL。
5.室溫 15000 g 離心 3-5 分鐘,，管底沉淀為細胞破碎物,。
6.將上清液 (約 1 mL）轉(zhuǎn)移到另一干凈的 2 mL 塑料離心管中。
7.加入等體積的無酚無氯仿植物 RNA 提取溶液 B,，充分顛倒混勻,。如果有沉淀產(chǎn)生(對某些植物，屬于正?，F(xiàn)象),，不必去掉沉淀，把所有的混合物上柱,。
8.將 0.7 mL 的混合溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,，15000 g 室溫離心 3 到 5 分鐘， 棄穿透液,。如果離心吸附柱里面有殘留液體沒穿透,，可以延長離心時間直到徹-底穿透。
9.將剩下的混合溶液按每次 0.7 mL 的方式轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，每次 15000 g 室溫離心 3-5 分鐘,，棄穿透液,。
10.由于混合液有 2mL 左右，所以三次轉(zhuǎn)移即可將混合液全部掛柱,。
11.加 0.7 mL 通用洗柱液,，室溫 15000 g 離心半分鐘，棄穿透液,。如果離心吸附柱里面有殘留液體沒穿透,，可以延長離心時間直到徹-底穿透。
12.再加 0.3 mL 通用洗柱液,，室溫 15000 g 離心半分鐘,，棄穿透液。
13.15000 rpm 室溫離心 10 秒以便去除殘留液體,。此步很重要,，否則殘留的乙醇會影響 RNA 的使用。
14.將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到 RNase-free 收集管中,，加入 50 μL RNA 洗脫液,，室溫放置 2 分鐘。
15.15000 g 室溫離心半分鐘,，離心管中溶液即為RNA 樣品,，可以立即使用或存放于-80℃待用。
16.RNA 完整性的電泳檢測:如果需要做 Northern 雜交,，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳,，因為非變性膠不能分離所有的RNA 分子。
17.RNA 產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將 5-10μL RNA 溶于TE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在 OD260 的光吸收,。通過光吸收可以得出 RNA 濃度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),，進而計算出 RNA 的產(chǎn)量(濃度×體積)和產(chǎn)率(RNA 產(chǎn)量/組織用量)。
18.RNA 純度測定:無污染的總 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,，但一般不影響 RT-PCR 等反應(yīng)。
選擇我們的無酚無氯仿植物RNA-提取試劑盒（過柱法）,，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！
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