目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>溶液>> 白細(xì)胞裂解液
參考價(jià) | ¥ 395 |
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更新時(shí)間:2025-04-27 15:37:29瀏覽次數(shù):40評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250 mL |
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貨號(hào) | XY-D-1856 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | White Cell Lysis Solution |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品為即用型白細(xì)胞裂解溶液,可以用于裂解分離純化好的血液白細(xì) 胞,,用于 DNA 提取、RNA 提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn),。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.即開即用,,無需客戶配置,。
2.本產(chǎn)品足夠處理 250 次 2 mL 的白細(xì)胞樣本,。
3.本產(chǎn)品只可用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
白細(xì)胞裂解液250 mL250 mL 本色瓶
使用手冊(cè)1 份無
運(yùn)輸及保存
常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年,。
自備試劑
Tris 飽和酚,、氯仿、3 M 乙酸鈉溶液(pH 5.2),、乙醇,、TE 緩沖液等,。
使用方法:
下面以 DNA 提取為例:
1.取新鮮抗凝血 5 mL,在 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中用紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞(紅細(xì)胞裂解液有幾種配方,,用戶需要根據(jù)所選產(chǎn)品的 使用手冊(cè)進(jìn)行操作,這里不列出每種的詳細(xì)步驟),,也可以直接 2500 rpm 離心 5 分鐘后取白細(xì)胞層到一新的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中,。
2.在所得的白細(xì)胞沉淀中或所得白細(xì)胞層溶液中加自備的生理鹽水使得 白細(xì)胞的終體積為 2 mL。
3.加 1 mL 的本產(chǎn)品,,混勻后 55℃保溫 3 小時(shí),,其間輕輕振搖數(shù)次,。
4.加入 3 mL 自備的 Tris 飽和酚,輕輕震搖 5 分鐘,,使得水相和酚相充分分開,。
5.3500 rpm 離心 15 分鐘,上層水相含 DNA,,中間白色層為蛋白質(zhì),下層為酚相,。
6.將非常粘稠的含DNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一干凈的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中,。
7.再用 Tris 飽和酚重復(fù)上面的抽提步驟,,直到離心后中間層沒有白色的蛋白出現(xiàn)為止,。
8.在上清液中加入等體積的自備的氯仿,輕輕震搖 5 分鐘,,3500 rpm 離
心 5 分鐘,,轉(zhuǎn)移上清液到一干凈的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中,。此步可以除去殘留的酚。
9.在上清液中加入 0.1 倍體積的自備的 3 M 乙酸鈉溶液(pH 5.2)和 2 倍體積的無水乙醇,,輕柔顛倒混勻,,將出現(xiàn)絮狀的 DNA 沉淀。
10.用移液槍頭將 DNA 沉淀挑取出來,,轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 的塑料離心管中,, 加入 0.5 mL 75%的乙醇浸泡 2 次。此操作可以去除 DNA 中殘留的鹽離子,。
11.轉(zhuǎn)移 DNA 沉淀到一個(gè) 1.5 mL 的塑料離心管中,,空氣中放置 10 分鐘左右待乙醇揮發(fā)后,加入 0.5 mL 自備的 TE 緩沖液溶解 DNA,,4℃放置待用,。
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