目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> DNA 片段加 A 試劑盒
參考價(jià) | ¥ 450 |
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更新時(shí)間:2025-04-27 09:46:06瀏覽次數(shù):44評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號(hào) | XY-D-1818 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品利用 Taq DNA polymerase 的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性,在只有 dATP 存在的情況下,,在平末端的 DNA 片段加上一個(gè) dA 尾巴,使平末端片段也能被 T 載體克隆,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.簡(jiǎn)單,,2×加 A MasterMix 中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備,。
2.適用于任何平末端的 DNA 片段,,包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成的 DNA 片段,。
3.產(chǎn)物可以直接用于與 T 載體的連接。
4.本產(chǎn)品足夠 50 次加 A 反應(yīng),。
5.DNA 片段加 A 試劑盒只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
2×加 A MasterMix1 mL2mL 本色管
使用手冊(cè)1 份無(wú)
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,,有效期一年,。
自備試劑
PCR 片段、超純水
使用方法:
一:反應(yīng)前純化處理:
用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶擴(kuò)增得到的 DNA 片段,,必須經(jīng)過(guò)徹-底的去除殘留的酶的處理過(guò)程(如酚/氯仿抽提或 Proteinase K 處理),,否則它們將在加 A 反應(yīng)時(shí),切除掉加上的 A 尾巴,,干擾反應(yīng),。可以采取膠回收和酚/氯仿抽提法等常規(guī)方法純化,,最后溶解在水或TE 中,,終濃度以 0.1 ug/uL 為宜。
二:加 A 反應(yīng)
在干凈的 0.5 mL 或 1.5 mL 離心管中,,分別加入回收的 DNA 片段(0.2-2 ug),,25 uL 2×加 A MasterMix,補(bǔ)水到 50 uL 后 72℃保溫 2 小時(shí)
三:反應(yīng)后處理
加 A 反應(yīng)后,,Taq DNA polymerase 將與 DNA 末端緊密結(jié)合,,所以必須酚/氯仿抽提去除。如果使用 Proteinase K 處理后再用酚/氯仿抽提效果會(huì)更好,。得到的 DNA 溶于適量水和 TE 中后即可用于 T 載體的連接反應(yīng),。
選擇我們的DNA 片段加 A 試劑盒,,就是選擇精準(zhǔn),、高效、可靠的檢測(cè)方案,,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,!
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