目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>溶液>> 單細胞裂解液(DNA 專用)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL |
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貨號 | XY-D-1809 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Single Cell Lysis Solution for DNA |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介:
單細胞裂解液(DNA 專用)是單細胞 DNA 檢測專用裂解液,。
產(chǎn)品特點:
1.快速裂解單個細胞,。
2.可有效抑制 DNase 在裂解過程中對 DNA 的破壞,維持 DNA 的穩(wěn)定性,。
3.裂解物可以直接用于測序和 PCR 等后續(xù)試驗,。
4.本產(chǎn)品足夠至少 200 次單細胞裂解實驗。
5.本產(chǎn)品只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
單細胞裂解液(DNA 專用)1 mL1.5 mL 本色管
使用手冊1 份無
運輸及保存
低溫運輸,,-20℃保存,有效期一年,。
自備試劑
待處理樣品,,液體細胞培養(yǎng)基,PBS 溶液,,卵裂球及囊胚單細胞制備試劑盒(可從本公司另購)
使用方法:
如何制備單個細胞取決于實驗樣品和實驗者所擁有的儀器設(shè)備,,此處所列步驟僅針對培養(yǎng)細胞、實體組織,、淋巴細胞和卵裂球(2-8 細胞胚胎)等材料,,對其他材料(如干細胞克隆、胚囊,、胚胎組織等),,用戶需自行選用合適的方法制備單細胞。對已經(jīng)處于單細胞懸浮狀態(tài)的細胞(如 FACS 分離細胞、卵細胞等),, 則可以跳過制備過程而直接進入單細胞裂解步驟:
一,、用培養(yǎng)細胞或?qū)嶓w組織制備單細胞:
1.按常規(guī)胰-酶方法處理培養(yǎng)細胞或組織,將細胞重懸于自備的液體細胞培養(yǎng)基中,。
2.按常規(guī)方法對細胞進行計數(shù),。
3.轉(zhuǎn)移 100-4000 個細胞到新離心管中,400 g 離心 4 分鐘沉淀細胞,,小心棄上清(培養(yǎng)基),。
4.將細胞沉淀重懸于 50 ?L 自備PBS 溶液中,使其終濃度為 2-80 個細胞/?L,。
5.在干凈的培養(yǎng)皿上點加數(shù)個含 5 ?L 的 PBS 溶液小液滴,,加入 5 ?L 細胞懸浮液到第一個小液滴中,然后再從第一個小液滴中轉(zhuǎn)移 5 ?L 到第二個小液滴,,如此系列稀釋樣品數(shù)次,,使得其濃度接近每 2.5 ?L 液體中含 1 個細胞, 放冰上待用,。
二,、用卵裂球或囊胚制備單個細胞
(具體方法參考卵裂球及囊胚單細胞制備試劑盒手冊)
三、用單細胞裂解液裂解細胞
6.在顯微鏡下用顯微注射儀取 2.5 ?L 樣品,,確認含一個細胞后,,將其轉(zhuǎn)移到一個含 2.5 ?L 單細胞裂解液的PCR 管中。最好同時設(shè)置無樣品的陰性對照
(2.5 ?L 樣品中不含細胞),。
7.在 2.5 ?L 樣品中,,顯微鏡下細胞懸液可直接用于單細胞裂解反應(yīng)。
8.裂解后可以放冰上待用,,如果長期不用,,可以放-80℃保存。四,、單細胞裂解物的 PCR 擴增
9.細胞裂解物從-80℃中取出后,,65℃保溫 10 分鐘,取出后放冰上待用,。
10.以一半或全部上步操作得到的細胞裂解物為模板,,按常規(guī)方法進行 PCR 反應(yīng)。
選擇我們的單細胞裂解液(DNA 專用),,就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,,為您的科研實驗保駕護航,!