目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 液體樣品 DNA 純化試劑盒(過柱法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1783 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Liquid Sample DNA Purification Kit |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子(咽-拭子,、鼻-拭子,、口腔拭子、陰道 拭子等)擠出液中提取微量 DNA 的產(chǎn)品,。
產(chǎn)品特點:
1.操作簡單,,整個過程只需要 20 分鐘左右。
2.不需要額外在洗柱液中補(bǔ)加乙醇,。
3.靈敏度高,,通過 PCR 檢測到的最終靈敏度可以達(dá)到 50 拷貝/mL 以下,。
4.安全無毒,不需要使用苯-酚和氯仿等有機(jī)溶液,。
5.如果加上病毒離心富集步驟,,最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。
6.與 PCR 和熒光PCR 兼容,。
7.價廉物美,性價比遠(yuǎn)高于國外同類產(chǎn)品,。
8.適用于各種材料,包括血清,、血漿、腦脊液,、尿液,、糞便,、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料,。
9.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取。
10.液體樣品 DNA 純化試劑盒(過柱法)只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù):
成分規(guī)格包裝
液體樣品 DNA 裂解液30 mL30 mL 本色瓶
上柱結(jié)合液40 mL60 mL 本色瓶
離心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
DNA 洗脫液(基因組純專用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手冊1 份無
運輸及保存
溫運輸及保存,DNA 病毒裂解液長期(1 月以上)放置時需要放 4℃,,有效期一年。
自備試劑
生理鹽水,, 1.5 mL Nase-free 離心管。
使用方法:
1.如果有 N 個樣品,,標(biāo)記 N+2 個 1.5-2 mL 螺旋蓋塑料離心管,多出的一個為陽性對照,,一個為陰性對照,。為避免污染,建議不要使用壓蓋式塑料離心管,。在每個管上做個標(biāo)記,,以在后續(xù)操作時區(qū)別向心面和離心面,。然后在離心管中分別加入 0.2 mL 液體樣品(血清、血漿,、尿液,、腦脊液、唾液,、眼淚等等),,陽性對照和陰性對照。
1.1,、 如果是口腔拭子,、咽喉拭子等各種拭子樣品,則將拭子放入 0.2 mL 自備生理鹽水中擠壓出液體,,然后取 0.2 mL 進(jìn)行提取,。
1.2、 如果是糞便等半固定樣品,,則取約 0.3 mL 的樣品,,加入 0.3 mL 自備生理鹽水,震蕩重懸,,離心取 0.2 mL 上清進(jìn)行提取。
1.3,、 如果血液,細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體,,可以離心后使用上清。血漿的抗凝劑必須是 EDTA 或 ACD,,不能是肝素,,否則肝素會抑制 PCR。使用ACD時由于所加入 ACD 會增加體積,,樣品會被稀釋,得到的病毒滴度會比使用 EDTA 低 15%左右,。血漿最好按 0.6 mL/管的量分裝保存,以避免反復(fù)凍融,。
1.4、 如果樣品是實體組織或培養(yǎng)細(xì)胞,,則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心,,取
0.2 mL 上清液(含病毒)進(jìn)行提取,,但此種情況下最后得到的液體 DNA 不可避免的會含有少量基因組 DNA 污染(但不影響PCR 檢測)。
1.5,、 如果富集液體樣品中的病毒,,可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃
24,000 g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 繼續(xù)操作,。
2.加入 0.6 mL 液體樣品 DNA 裂解液到各離心管中,,振蕩 30 秒混勻后室溫放置 10 分鐘裂解病毒,。注意:液體樣品 DNA 裂解液在 4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用,。
3.加入 0.8 mL 上柱結(jié)合液到離心管中,,顛倒混勻后轉(zhuǎn)移一半的混合液(0.8 mL)到離心吸附柱中,,室溫放置 2 分鐘。
4.12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,,棄收集管中的穿透液,,把離心吸附柱放回到收集管中。
5.將剩余的另外一半裂解液(0.8 mL)轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,,室溫放置 2 分鐘,。
6.12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,棄收集管中的穿透液,,把離心吸附柱放回到收集管中。
7.加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,,12,000 rmp 室溫離心半分鐘,,棄收集管中的穿透液,把離心吸附柱放回到收集管中,。
8.加入 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,,12,000 rmp 室溫離心半分鐘,,棄收集管中的穿透液,,把離心吸附柱放回到收集管中,。此為第二次洗滌,,可以跳過,。
9.12,000 rpm 室溫離心半分鐘(干甩),棄含穿透液的離心管,。
10.將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的 1.5 mL RNase-free 離心管中,,在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-100 ?L DNA 洗脫液(基因組純化專用),然后室溫放置 2 分鐘。
11.12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘,,離心管中的溶液即為病毒期保存,。
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