日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

動(dòng)物線粒體 DNA（mtDNA）是進(jìn)行分子進(jìn)化研究和母性遺傳研究的重要材料，但傳統(tǒng)的兩步式動(dòng)物 mtDNA 提取方法需要先溫和裂解動(dòng)物細(xì)胞,，分離線粒體,，然后再?gòu)木€粒體中提取mtDNA。此方法中的溫和裂解細(xì)胞的條件十分難以控制,，需要針對(duì)不同組織材料單獨(dú)進(jìn)行優(yōu)化,，因此純化效果差異很大。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.不需要單獨(dú)純化線粒體,，操作簡(jiǎn)單快捷,。

2.得到的動(dòng)物 mtDNA 只能用于 PCR 分析，不能用于其它實(shí)驗(yàn),。

3.可以用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞,，實(shí)體動(dòng)物組織和血液。每 1E7 個(gè)動(dòng)物細(xì)胞一般能得到 100 ng 左右的mtDNA,，每克實(shí)體動(dòng)物組織一般能得到 1-2 ?g mtDNA,。

4.本產(chǎn)品不能用于純化植物線粒體 DNA（需要另購(gòu)）。

5.本試劑盒足夠 50 次微量提取,。

6.動(dòng)物線粒體DNA純化試劑盒（過柱法,，PCR級(jí)）只可用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

動(dòng)物線粒體 DNA 純化溶液 A13 mL15 mL 本色瓶

動(dòng)物線粒體 DNA 純化溶液 B13 mL15 mL 棕色瓶

動(dòng)物線粒體 DNA 純化溶液 C18 mL30 mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脫液（基因組純化用）

10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

待處理樣品,，0.25%胰-酶消化液,，PBS 緩沖液,，1.5 mL 塑料離心管

自備試劑

常溫運(yùn)輸與保存，有效期為 12 個(gè)月,。

使用方法：

一,、培養(yǎng)細(xì)胞的預(yù)先處理（本試劑盒不含相關(guān)試劑）

1.用自備的 0.25%胰-酶消化液處理約 1E7 個(gè)培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞，離心收集后棄上清,，保留細(xì)胞沉淀。

2.用PBS 緩沖液洗滌細(xì)胞沉淀兩次,，最后得到的細(xì)胞沉淀將直接用作動(dòng)物 mtDNA

提取的材料,。

二、動(dòng)物組織細(xì)胞預(yù)處理（本試劑盒不含相關(guān)試劑）

3.用剪刀將 1 g 新鮮的動(dòng)物組織-剪碎（芝麻大小最好）,，轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 塑料離心管中,，直接用作動(dòng)物 mtDNA 提取的材料。注意：不能使用凍存的動(dòng)物組織,，因?yàn)閮瞿^程中形成的冰晶會(huì)將線粒體膜和細(xì)胞膜刺破,，其DNA 已經(jīng)釋放出來(lái)， 被體液中的 DNA 酶降解,。

三,、血液預(yù)處理

4.將 3-5 mL 抗凝外周血靜置 30 分鐘或低速離心 5 分鐘，取白細(xì)胞層,。

5.用自備 PBS 緩沖液洗滌白細(xì)胞兩次,，得到的白細(xì)胞沉淀用于mtDNA 提取。四,、線粒體粗提物制備

6.用自選方法將 1E7 個(gè)培養(yǎng)細(xì)胞或 1 g 實(shí)體組織勻漿,。

7.室溫 700×g 離心 6 分鐘，收集上清,。

8.將上清在室溫 10000×g 離心 10 分鐘,，得線粒體粗提物沉淀。五,、mtDNA 提取

9.在細(xì)胞沉淀或剪碎的組織或線粒體粗提物沉淀中加入 250 ?L 冰浴的動(dòng)物線粒體

DNA 純化溶液 A,，充分吹打分散。如果是剪碎的組織,，不要等成塊的組織溶解即可繼續(xù)下步操作,。

10.加入 250 ?L 常溫的動(dòng)物線粒體 DNA 純化溶液 B（如果溶液B 有沉淀，用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用）,，輕柔顛倒混勻 10 次,，不要?jiǎng)×艺袷帯?/p>

11.冰上放置 6-8 分鐘。注意不要超過 8 分鐘,。

12.加入 350 ?L 冰浴的動(dòng)物線粒體 DNA 純化溶液 C,，輕柔顛倒混勻 6 次,，可見白色沉淀物產(chǎn)生。冰上放置 20 分鐘,。

13.室溫 13000×g 離心 10 分鐘,，小心將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。由于此時(shí)的 溶液比重較大,，有時(shí)候出現(xiàn)沉淀漂浮是正?，F(xiàn)象，取上清時(shí)避開漂浮的沉淀即可,。

14.靜置 5 分鐘以讓DNA 與離心吸附柱充分結(jié)合,，此步十分重要。

15.室溫 13000×g 離心 1 分鐘,，棄收集管中的廢液,。

16.加入 500 ?L 的通用洗柱液，室溫 13000×g 離心 1 分鐘,，棄收集管中廢液,。

17.重復(fù)上步 1 次。

18.室溫 13000×g 離心 1 分鐘,，甩干殘留液體,。此步不能省略，否則殘留通用洗柱液會(huì)影響DNA 的后續(xù)使用（如DNA 上樣時(shí)不能沉淀到加樣孔中）,。

19.將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 mL 塑料離心管中,，加入 50 ?L DNA 洗脫液（基因組純化用），室溫放置 2 分鐘,。

20. 室溫 13000×g 離心 1 分鐘,，離心管底溶液即mtDNA。每 1E7 個(gè)動(dòng)物細(xì)胞一般能得到 100 ng 左右的 mtDNA,，每克實(shí)體動(dòng)物組織一般能得到 1-2 ?g 的 mtDNA,。所得 DNA 量較少，不推薦使用 OD 檢測(cè)或電泳檢測(cè)的方式對(duì)所得DNA進(jìn)行檢測(cè),。檢測(cè)如果 DNA 需要濃縮,，可以使用本公司的核酸濃縮劑。本試劑盒

得到的 mtDNA 一般有斷裂,，電泳時(shí)不呈現(xiàn)專一的帶,，但不影響作為 PCR 模板。

選擇我們的動(dòng)物線粒體DNA純化試劑盒（過柱法,，PCR級(jí)）,，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！