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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒是基于T7 RNA 聚合酶的 RNA 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒，它利用含有 T7 啟動子的模版 DNA,，以 NTP 和m7G(5' )ppp(5' )G 為底物,，從 T7 啟動子下游開始合成與模版 DNA 中一條鏈互補(bǔ)的 RNA，簡單快速獲得大量的 RNA 分子,，其中部分 5 端含有帽結(jié)構(gòu),。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開即用，用戶只需提供含 T7 啟動子的 DNA 模板即可以進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn),， 不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每一個成份,。

2.體外轉(zhuǎn)錄和加帽同管一步式進(jìn)行，不需要先體外轉(zhuǎn)錄再加帽,。

3.單溶液預(yù)配液,，減少加樣次數(shù)，避免了操作誤差,，增加了可重復(fù)性,。

4.模版 DNA 可以是線性化的質(zhì)粒 DNA，也可以是 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物,。

5.可以合成的 RNA 的最佳長度在 20 nt 到 2000 nt 之間,。

6.產(chǎn)品配方經(jīng)過精心優(yōu)化，每μg DNA 模版可以合成 2-6 μg RNA,。

7.得到的加帽 RNA 比不加帽的 RNA 更穩(wěn)定,，可以用于 RNA 結(jié)構(gòu)研究、核酶生物化學(xué),、體外翻譯,、RNA-蛋白質(zhì)相互作用、反義技術(shù),、SELEX 技術(shù)和 RNA 干擾（RNAi）等實(shí)驗(yàn),。

8.本試劑盒足夠 5 次 20 μL 體系的體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)，并且只能用于科研,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份規(guī)格包裝

2×T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽預(yù)配液50 μL0.5 mL 本色蓋

T7 RNA 聚合酶-RI 混合液5 μL0.5 mL 黃蓋管

RNase-free 水100 μL1.5 mL 藍(lán)蓋管

使用手冊1 份無

保存和運(yùn)輸

T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒低溫運(yùn)輸，-20℃保存,、有效期一年,。

自備試劑

Tris 飽和酚、氯仿,、RNase-free 75%乙醇(均可從本公司另購)

疑難解答：

1,、沒有 RNA 產(chǎn)物。最常見原因是模板有 RNase 污染,，可用純化好的 RNA 跟模板 DNA 一起保溫再電泳,，再檢測其是否有污染,。

2、RNA 產(chǎn)量低,。最常見的原因是 DNA 模板,。在轉(zhuǎn)錄序列的第一個和第二個堿基最好都是 G，在前 14 個堿基內(nèi)避免有 U 存在,。

3,、RNA 長度比預(yù)期的短?？赡苁悄０逍蛄兄杏蠺7 RNA 聚合酶的終止序列,。可以改用 SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒（啟動子也必須改成 SP6 啟動子）,。

4,、RNA 長度比預(yù)計(jì)的長。T7 RNA 聚合酶跟Taq DNA 聚合酶一樣,，有不依賴于模板的加尾功能,，最多有一半的 RNA 可以帶一個或兩個堿基的尾巴。如果RNA 長度比預(yù)計(jì)的長很多,，模板又是質(zhì)粒 DNA,，則可能是質(zhì)粒線性化不徹-底。

5,、5’單磷酸還是三磷酸,。如果使用 GTP，則得到的 RNA 是三磷酸,，體外轉(zhuǎn)錄時如果保溫時間太長（如 12 小時）,，則有 50%的三磷酸會變成單磷酸。如果在轉(zhuǎn)錄體系中加入 GMP,，則 T7 RNA 聚合酶將優(yōu)先使用 GMP,，所得 RNA

產(chǎn)物中 5’端是單磷酸的比例將大大增加。

選擇我們的T7 體外轉(zhuǎn)錄及加帽試劑盒,，就是選擇精準(zhǔn),、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！