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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品是經(jīng)過(guò)本公司柱式RNA 純化試劑盒純化的分子生物學(xué)級(jí)別的酵母tRNA 溶液，濃度為 5 mg/mL,，不含蛋白質(zhì)和 DNA 污染,，OD260/OD280 在 1.9 左右，可直接用作微量 RNA 和 DNA 提取,，RNA 和 DNA 片段回收的助沉劑,，也可以用作原位雜交、Northern 雜交的封堵劑,，對(duì)于探針為 RNA 的雜交試驗(yàn)尤其適用,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份規(guī)格包裝

精提酵母tRNA 溶液（5 mg/mL）1.5 mL1.5 mL 白蓋管

使用手冊(cè)1 份無(wú)

保存和運(yùn)輸

精提酵母tRNA溶液，5 mg/mL低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，有效期一年

自備試劑

無(wú)水乙醇,，75%乙醇

使用方法：

一：本產(chǎn)品作核酸助沉劑使用

注：由于 tRNA 是多聚核苷酸激酶和末端轉(zhuǎn)移酶的底物，因此如果回收的 DNA 或RNA 要用于此類反應(yīng),，就不能使用 tRNA 作為助沉劑,，需要改用糖原或聚丙烯酰胺（需要從本公司另購(gòu)）。如果回收的 RNA 或 DNA 要用于 RT-PCR 和 PCR 擴(kuò)增,， 最好先確認(rèn)所用引物不會(huì)跟酵母 tRNA 結(jié)合,，否則可能會(huì)產(chǎn)生非特異擴(kuò)增。

1.在核酸(DNA 或/和 RNA)溶液中,，加入適當(dāng)種類和濃度的鹽離子,，鹽離子不同其終濃度也不相同，具體如下：

鹽終濃度

NH4OAc (醋酸銨）0.5 M

NaCl (氯化鈉)0.25 M

NaOAc (醋酸鈉）0.3 M

2.加入本產(chǎn)品使其終濃度為 20 ug/mL,，混合均勻,。

3.加入兩倍體積的自備無(wú)水乙醇，混合均勻,。

4.冰上放置 15 分鐘,。

5. 12000-15000 × g 離心 15 分鐘以上，小心移棄上清,。

6. 用 1 mL 75%乙醇洗一次（加入 1 mL 75%乙醇,，振蕩混勻后 12000-15000

× g 離心 5 分鐘，小心移棄上清）,。

7.短暫離心數(shù)秒,，小心移棄殘留液體。

8.將沉淀溶于適當(dāng)緩沖液中待用,。

二：本作為雜交封堵劑

本產(chǎn)品可以作為原位雜交液,、Northern 雜交液和 RNA 斑點(diǎn)雜交液的封堵劑， 也可以作為 Southern 雜交液和 DNA 斑點(diǎn)雜交液的封堵劑,，但不適于作為菌斑雜交的封堵劑,，其在雜交液或預(yù)雜交液中的終濃度為 100ug/mL。如果使用 RNA 探針,，最好使用 tRNA 精提液做封堵劑,，以保護(hù) RNA 探針。

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