目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>染料>> 核酸電泳染料(可見光型)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ml |
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貨號 | XY-D-1678 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | DNAgreen(Visible Light) |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是國-內(nèi)-首-款可見光核酸染料,,用于電泳時替代 EB,在可見光下觀察DNA 或 RNA 的電泳,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.無毒,。對人體和環(huán)境沒有任何毒害,,有利于保護(hù)使用者的健康和保護(hù)日益惡化的環(huán)境,。
2.實(shí)時染色??梢栽陔娪具^程中實(shí)時觀察 DNA 和 RNA 的泳動,,不需要任何額外的儀器設(shè)備或光源。
3.由于避免了 UV 對 DNA 的傷害,,膠回收片段的克隆效率比 UV 下回收的片段高 2-10 倍,,非常適用于 PCR 或酶切回收。
4.穩(wěn)定,。對光,、水和熱的穩(wěn)定性很好,可加入瓊脂糖凝膠中反復(fù)熔化,。
5.靈敏,。檢測靈敏度比 EB 低一倍,能滿足常規(guī)核酸電泳實(shí)驗要求,。
6. 跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如超快核酸電泳液,、TBE,、TAE)兼容。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
成分規(guī)格包裝
核酸電泳染料(可見光型)10 mL10 mL 棕色瓶
使用手冊1 份無
保存和運(yùn)輸
常溫運(yùn)輸和保存(長期保存最好放 4℃),,保存期限一年,。
自備試劑
電泳相關(guān)緩沖液和凝膠。
使用方法:
電泳中染色(瓊脂糖電泳時使用)
1.在 100 mL 融化的瓊脂糖凝膠加入 100 ?L 本產(chǎn)品,,充分混合均勻后倒膠,, 凝固后凝膠將呈淡紫色。本產(chǎn)品不能跟其他任何核酸染料同時使用(如 EB 和 SYBR Green I),,否則會相互干擾,,不會出現(xiàn)任何條帶。使用時請嚴(yán)格按照此比例加入染料,,否則將出現(xiàn)糊帶現(xiàn)象,。
2.將凝固的瓊脂糖凝膠放在TEB 或 TAE 中。為節(jié)約染料,,不推薦將染料加到電泳緩沖液中,。
3.將 DNA 樣品與 DNA 上樣液混合后上樣,由于本染料比 EB 靈敏度稍低,, 所以 DNA 的上樣量和 DNA Marker 的上樣量最好比使用 EB 染料時多 1
倍,。注意:不推薦使用常規(guī)的含溴酚藍(lán)和二甲苯藍(lán)的上樣液,因為這些染
料的顏色跟 DNA 和 RNA 的顏色都將呈藍(lán)色,,將嚴(yán)重干擾條帶的觀察和解讀,。
4.電泳,電泳參數(shù)同常規(guī)的電泳,。跑在前面的是紅色的電泳示蹤染料(來于上樣液),,其泳動速度相當(dāng)于 50 bp 的 DNA。
5.直接在光線明亮的位置直接觀察電泳的進(jìn)行,,DNA 和 RNA 將呈現(xiàn)藍(lán)色條帶,。如果有觀察X 光片用的白色燈箱,可以將電泳中的電泳槽或電泳后的凝膠平放在鋪有塑料布的白色燈箱發(fā)光面的上面觀察效果更佳,。典型電泳結(jié)果如下:
6.如果要回收 DNA,,則關(guān)閉電泳后直接切下所需條帶,其余回收過程同常規(guī)方法,。
疑難解答
使用方法之二:電泳后染色(PAGE 膠染色必須使用電泳后染色法,,瓊脂糖電泳也可以選擇本方法。不論是PAGE 膠還是瓊脂糖膠,,本方法所需染料的用量比電泳中染色大 2-10 倍)
7.按照常規(guī)方法進(jìn)行PAGE 電泳或瓊脂糖電泳,。
8.用電泳液將本產(chǎn)品稀釋 100-500 倍(100 mL 水需要加 0.2-1 mL 本產(chǎn)品),將膠放入,,室溫下?lián)u晃染色 1-10 分鐘即可看見藍(lán)紫色的 DNA 和RNA 條帶,。具體染色多長時間取決于 DNA 和 RNA 的濃度,。
9.染色液可以避光放 4℃保存,能反復(fù)使用數(shù)次,。Q:為何電泳的前沿出現(xiàn)下圖這種只出現(xiàn)一條帶的情況呢,?
A: 這是由于樣品中有大量 RNA 小片段污染(基因組 DNA 提取時沒有 RNase 處理的話常常會有大量 RNA 污染),這些小片段裹走了凝膠中的染料,,使其后面的凝膠區(qū)域沒有染料,,因此后面的大片段沒法染色。建議電泳后再染色觀察大片段,。
Q: 本產(chǎn)品可否用于RNA 染色,?
A:可以,也呈藍(lán)紫色條帶,。
Q:本產(chǎn)品是否可以加入上樣液中進(jìn)行染色,?
A:不行,本產(chǎn)品只能直接加入瓊脂糖凝膠中進(jìn)行染色或PAGE 電泳后再染色,。
Q:為何電泳時間長的話前端的 DNA 和 RNA 條帶很淡或根本看不見,?
A:跟 EB 一樣,電泳時本產(chǎn)品朝負(fù)極方向移動,,當(dāng)前端的 DNA(最小片段) 進(jìn)入沒有染料的區(qū)域時,,已經(jīng)跟 DNA 或 RNA 結(jié)合的染料分子會逐漸脫落, 所以條帶會變淡或看不見,。解決辦法之一是縮短電泳時間或電泳后再染色,。
Q:本產(chǎn)品在哪種緩沖液中效果-最好?
A:本產(chǎn)品跟各種電泳緩沖液兼容,,但背景最淺的是中超快核酸電泳液,。
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