目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>溶液>> 單細胞裂解液(RNA 專用)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL |
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貨號 | XY-D-1677 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Single Cell Lysis Buffer(For RNA) |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
單細胞裂解液(RNA 專用)是單細胞 RNA 提取專用裂解液,,產(chǎn)品經(jīng)過多次優(yōu)化,,含有多種去污劑,、變性劑和鹽,,可有效抑制核酸酶在裂解過程中對核酸的 破壞,,維持核酸的穩(wěn)定性。單細胞裂解物可以直接用于測序和 RT-PCR 等試驗,。
本產(chǎn)品足夠使用 200 次以上,,一次可以處理 1-1000 個細胞。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
1mL
保存和運輸
低溫運輸,,﹣20℃保存,,有效期一年。
自備試劑
PBS 溶液
使用方法:
如何制備單個細胞取決于實驗樣品和實驗者所擁有的儀器設(shè)備,,此處所列步 驟僅針對培養(yǎng)細胞,、實體組織、淋巴細胞和卵裂球(2-8 細胞胚胎)等材料,對其他材料(如干細胞克隆,、胚囊,、胚胎組織等),用戶需自行選用合適的方法制備單細胞,。對已經(jīng)處于單細胞懸浮狀態(tài)的細胞(如 FACS 分離細胞,、卵細胞等)則可以跳過制備過程而直接進入單細胞裂解步驟。
按下面手冊,,本產(chǎn)品 1 次可以處理 1-1000 個細胞,。下面的步驟是以制備單個細胞/裂解反應(yīng)為例,如果要制備 N 個細胞/裂解反應(yīng)的懸浮液,,濃度需要相應(yīng)調(diào)整,。
一、用培養(yǎng)細胞或?qū)嶓w組織制備單細胞
1.按常規(guī)胰-酶方法處理培養(yǎng)細胞或組織(一般是用 PBS 洗滌兩次,,再用 0.25 % Trypsin-EDTA 處理 2 分鐘),,將細胞重懸于自備的液體細胞培養(yǎng)基中。
2.按常規(guī)方法對細胞進行計數(shù),。
3.轉(zhuǎn)移 100-4000 個細胞到新離心管中,,400×g 離心 4 分鐘沉淀細胞,小心棄上清(培養(yǎng)基),。
4.將細胞沉淀重懸于 50 μL 自備的 PBS 溶液中,,使其終濃度為 2-80 個細胞 / μL。
5.在干凈的培養(yǎng)皿上點加數(shù)個含 5 μL PBS 溶液的小液滴,,也可以在 96 孔板或
0.2 mL PCR 管中進行,。
6. 在第一個小液滴中加入 5 μL 細胞懸浮液,然后再從第一個小液滴中轉(zhuǎn)移 5 μL 到第二個小液滴,,如此系列稀釋樣品數(shù)次,,使得其濃度接近每 2.5 μL 液體中含 1 個細胞,放冰上待用,。二,、用單細胞裂解液裂解細胞
7.在顯微鏡下用顯微注射儀取 2.5 μL 樣品,確認含一個細胞后,,將其轉(zhuǎn)移到一
個含 2.5 μL 本產(chǎn)品的 PCR 管中,。最好同時設(shè)置無樣品的陰性對照(2.5 μL樣品中不含細胞)。
8.細胞將在 5 分鐘內(nèi)裂解,。
9.裂解液可以立即用于后續(xù)實驗(如 PCR 或 RT-PCR),,也可以放冰上數(shù)小時待用。如果長期不用,,需要放-80℃保存,。使用時從-80℃中取出后,放冰上融化后即可使用。
選擇我們的單細胞裂解液(RNA 專用),,就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,,為您的科研實驗保駕護航,!