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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品專(zhuān)門(mén)用于從血清(血漿或腦脊液),、病毒拭子保存液、培養(yǎng)基等液 體樣品中提取微量病毒 RNA 的產(chǎn)品,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.操作簡(jiǎn)單快捷,，整個(gè)過(guò)程只需要 30 分鐘左右,。

2.靈敏度高，通過(guò) RT-PCR 檢測(cè)到的靈敏度最高可以達(dá)到 50 拷貝/mL

（根 PCR 條件相關(guān)）,。

3.安全無(wú)毒,，不需要使用苯-酚和氯仿等有機(jī)溶液。

4.一般一次可以處理 0.2 mL 樣品,。如果加上病毒離心富集步驟,，最多可以處理 1.5 mL 樣品。

5.得到的 RNA 可以用于后續(xù)的 RT-PCR 和熒光定量 RT-PCR,。

6.價(jià)廉物美,，性?xún)r(jià)比遠(yuǎn)低于國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品。

7.適用于各種材料,，包括血清,、血漿、腦脊液,、尿液,、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞  上清液等無(wú)細(xì)胞材料,。

8.病毒RNA-提取試劑盒（過(guò)柱法）只能用于科研,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份包裝包裝

病毒裂解液30 mL30mL 本色瓶

核酸掛柱液40 mL60mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60mL 本色瓶

RNA 洗脫液10 mL10mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

保存和運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸和保存，RNA 病毒裂解液長(zhǎng)期（1 周）放置需放 4℃,，有效期一年,。

自備試劑

無(wú)

使用方法：

1.如果有 N 個(gè)樣品，標(biāo)記 N+2 個(gè) 1.5-2 mL 螺旋蓋塑料離心管,，多出的一個(gè)為陽(yáng)性對(duì)照,，一個(gè)為陰性對(duì)照。為避免污染,，建議不要使用壓蓋  式塑料離心管,。在做標(biāo)記時(shí)，最好標(biāo)出向心面或離心面,，以便在后續(xù)  離心后取上清時(shí) 不會(huì)把沉淀丟失,。

2.各加入 0.2 mL 液體樣品（血清、血漿,、尿液,、腦脊液、唾液,、眼淚等等）,。

2.1、 如果是口腔拭子,、咽喉拭子等各種拭子樣品,，則將拭子放入 0.2mL 自備生理鹽水中擠壓出液體,，然后取 0.2 mL 進(jìn)行提取。

2.2,、 如果是糞便等半固定樣品,，則取約 0.3 mL 的樣品，加入 0,3自備生理鹽水,，震蕩重懸,，離心取 0.2 mL 上清進(jìn)行提取。

2.3,、 如果血液,，細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體，可以離心用上清,，也可以直接取用,，但后者提取的 RNA 中有細(xì)胞的基因組 DNA 污染。血漿的抗凝劑必須是 EDTA 或 ACD,，不能是肝素,。使用ACD 時(shí)由于所加入 ACD 會(huì)增加體積，樣品會(huì)被稀釋?zhuān)玫降牟《镜味葧?huì)比使用 EDTA 低 15%左右,。血漿最好按 0.6 mL/ 管的量分裝保存，以避免反復(fù)凍融,。

2.4,、 如果樣品是實(shí)體組織或培養(yǎng)細(xì)胞，則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心,，用 0.2 mL 上清液（含病毒）進(jìn)行提取,，但此種情況下最后得到的 RNA 不可避免的會(huì)含有基因組 DNA 污染。

2.5,、 如果是病毒樣品保存液或病毒-采樣管,，則直接取用 0.2 mL 保存液。

2.6,、 如果液體樣品中的病毒需要富集,，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃ 24,000×g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 繼續(xù)操作,。

3.加入 0.6 mL 病毒裂解液,，振蕩 30 秒混勻。注意：病毒裂解液在 4℃ 放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用,。

4.室溫放置 10 分鐘。

5.加入 0.8 mL 核酸掛柱液到離心管中,，顛倒混勻后轉(zhuǎn)移一半的混合液

（0.8 mL）到離心吸附柱中,。

6.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘,，棄收集管中的穿透液， 把離心吸附柱放回到收集管中,。

7.將剩余的另外一半裂解液（0.8 mL）轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,。

8.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中的穿透液,， 把離心吸附柱放回到收集管中,。

9.加入 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000×g 室溫離心 1 分鐘,，棄收集管中的穿透液,，把離心吸附柱放回到收集管中。

10.加入 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,，12,000×g 室溫離心 1 分鐘,，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中,。此步為第二次洗滌,，可以跳過(guò)。

11.12000×g 室溫離心半分鐘,，去掉離心吸附柱中殘留的液體,。

12.在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30-50 μL RNA 洗脫液，然后將離心吸附柱套入一新的 1.5 mL 離心管中.

13.室溫放置 2 分鐘后 12,000×g 室溫離心 1 分鐘,，離心管中收集的樣品即為 RNA,。

14.RNA 樣品可以直接用于 RT-PCR 或逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，也可放-80℃長(zhǎng)期保存,。

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