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產(chǎn)品簡介：

十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）不僅可用于檢測蛋 白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量，而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一,，隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化,，有必要從凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡,、氨基酸組分分析或末端序列測定等,。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的中量蛋白膠回收法。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.簡單,，不需要復(fù)雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）,。

2.適用于變性 PAGE 膠（如 SDS-PAGE）和非變性 PAGE 膠。

3.每次可以處理 1 g 的 PAGE 膠（具體含多少蛋白質(zhì)取決于上樣的濃度）,。

4.回收率一般在 50-90%之間（跟蛋白質(zhì)親水性,、大小、洗脫時(shí)間相關(guān)）,。

5.跟后續(xù)的實(shí)驗(yàn)兼容,，包括 2-D 電泳、質(zhì)譜測序,、EMSA 或其它活性檢測實(shí)驗(yàn)等,。

6.蛋白膠中量回收試劑盒（沉淀法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份規(guī)格包裝

蛋白膠中量純化溶液 A5mL5 mL 本色瓶

蛋白膠中量純化溶液 B50 mL50 mL 本色瓶

20mL 塑料注射器5 只塑料袋

使用手冊(cè)1 份無

保存和運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸和保存,，有效期一年,。

自備試劑

無

使用方法：

1.按常規(guī)方法進(jìn)行變性（SDS-PAGE）或非變性 PAGE 蛋白電泳,。

2.切取含目的蛋白條帶的 PAGE 膠（盡可能地把多余的膠切除，否則會(huì)影響回收效率）,。注意：PAGE 膠固定和染色后蛋白回收效果很差,，所以建議把樣品分多孔上樣，電泳后只切其中一個(gè)樣孔的膠條進(jìn)行固定和染色,，  然后將此膠條放回到在整體膠中原來的位置,，通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對(duì)應(yīng)區(qū)域，并切下此區(qū)域的膠進(jìn)行回收,。

3.將切下的,、重量不超過 1 克的膠塊轉(zhuǎn)移到 20 mL 塑料注射器中（不安裝針頭）。用塑料注射器推桿將膠塊從端口擠壓出去,，使之變成細(xì)小的碎片,，  用自備的 15mL 塑料離心管收集這些破碎的凝膠顆粒。也可用其他方法搗碎 PAGE 膠條,，包括液氮研磨,。膠條越碎，蛋白回收率越高,。

4.加入 1 mL 蛋白膠中量純化溶液 A,，4℃脫色搖床上搖晃洗脫至少 16 小時(shí)（過夜）。此期間最好將蛋白膠中量純化溶液 B 放在-20℃冰箱預(yù)冷待用,。

5.10,000 g 離心 10 分鐘,，轉(zhuǎn)移上清（含回收蛋白）到新的 10-15mL 的塑料離心管中，注意不要吸取 PAGE 膠碎片,。

6.加入 5 倍體積的預(yù)冷的蛋白膠中量純化溶液 B,，搖晃混勻。

7.-20℃放置至少 30 分鐘,。

8.室溫 12,000 g（注意：一定要檢查使用的離心管是否能夠耐受此離心力,， 如果不能建議將溶液分到 1.5 mL 的塑料離心管中再在臺(tái)式離心機(jī)上進(jìn)行離心處理）離心 20 分鐘，小心棄上清,，不要吸走沉淀,。

9.室溫充分晾干，得到的沉淀即為回收的蛋白質(zhì),?；厥盏牡鞍踪|(zhì)可溶解在跟

后續(xù)測試兼容的緩沖液中，直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)（2-D 電泳,、質(zhì)譜測序等）,。

選擇我們的蛋白膠中量回收試劑盒（沉淀法），就是選擇精準(zhǔn),、高效,、可靠的檢測方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！