目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 單鏈DNA環(huán)化試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-1634 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | ssDNA Circularization Kit |
| 保存條件 | -20℃ | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
本試劑盒用于環(huán)化單鏈 DNA,。
產(chǎn)品特點：
1.即開即用，十分簡單方便,，用戶不需要辛苦摸索條件,。
2.ssDNA 的 5’必須有磷酸基團，3‘必須是羥基基團,。
3.適用于長度在 20nt 以上的單鏈 DNA,。
4.環(huán)化效率-最高可以達到 90%以上（ssDNA 越長，效率越低）,。
5.本產(chǎn)品對 ssRNA 也有環(huán)化能力,，故模板中不得有 RNA 污染,。
6.所得單鏈環(huán)狀 DNA 可以用于 RCA 擴增。
7.本產(chǎn)品足夠 50 次 10uL 體系的 ssDNA 環(huán)化反應(yīng),。
8.單鏈DNA環(huán)化試劑盒只能用于科研,。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
| 成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
| 10×單鏈 DNA 環(huán)化反應(yīng)液 A | 50uL | 0.5mL 綠蓋管 |
20×單鏈 DNA 環(huán)化反應(yīng)液 B | 25uL | 0.5mL 白蓋管 |
| 25×單鏈 DNA 環(huán)化酶 | 20uL | 0.5mL 紅蓋管 |
超純水 | 1mL | 1.5 mL 藍蓋管 |
| 使用手冊 | 1 份 | 無 |
保存和運輸
低溫運輸，-20℃保存,有效期為一年,。
自備試劑
ssDNA 模板,。
使用方法：
1.準備單鏈 DNA 模板：可以用自選的方法制備單鏈 DNA 模板，最-簡單的方式是直接人工合成單鏈 DNA,，但必須將 5 端修飾為磷酸基團（合成 DNA 5 端的默認基團是-OH）,。如果單鏈 DNA 來源于其他反應(yīng)體系，則最好電泳回收（如尿素-PAGE電泳）以便去除其他成分對環(huán)化反應(yīng)的干擾,。為了方便后續(xù)克隆,，可以在待突變 片段兩端設(shè)計成專一的、不存在于其他位置的限制性內(nèi)切酶位點,。
2.設(shè)置單鏈 DNA 環(huán)化反應(yīng),，在 PCR 管中按下表加入各成分：
成分樣品管陰性對照
5 端磷酸化的單鏈 DNA
（終濃度為 10pmol/uL）5uL5uL
10×單鏈DNA 環(huán)化預(yù)混反應(yīng)液A1uL1uL
20×單鏈DNA環(huán)化預(yù)混反應(yīng)液B0.5uL0.5uL
25×單鏈 DNA 環(huán)化酶0.4uL
超純水3.1uL3.5uL
3.65℃保溫 1 小時。需要加熱蓋,，否則反應(yīng)體系中的水會蒸發(fā),。
4.如果需要去除沒有環(huán)化的單鏈 DNA，可以直接加入 10U 的 Exonuclease 37℃酶切 15 分鐘,。本試劑不含相關(guān)成分,。也可以加入本公司的線狀 DNA 清除劑（需要另購）。
5.90℃10 分鐘滅活反應(yīng)體系,。如果不能加熱,，可以加入自備的 10mM EDTA。
選擇我們的單鏈DNA環(huán)化試劑盒,，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！
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