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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

指甲的主要成分是角化蛋白，可以抵抗自然界中大多數(shù)的酶和化學(xué)物質(zhì),，不易分  解,，正是因?yàn)橹讣孜镒C的不易破壞性、形態(tài)穩(wěn)定性,，指甲物證對(duì)于案件偵破具有關(guān)鍵  作用,。目前市場(chǎng)上專門用于法醫(yī)指甲樣品 DNA 提取的產(chǎn)品很少，為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 充分的酶法降解和快速的柱式提取相結(jié)合,，前者使 DNA 充分釋放，后者使雜質(zhì)充分被去除,。

2.DNA 回收率一般在 0.5 μg/100 mg 左右（理論產(chǎn)率一般是 0.1-1.5 μg 之間）,。

3.DNA 純度高，OD 比值一般在 1.6-1.8 之間,。

4.提取的 DNA 能夠用于電泳,、酶切、雜交檢測(cè)和 PCR,。

5.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取,。

6.法醫(yī)指甲 DNA-提取試劑盒（過柱法）只可用于科研,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

保存和運(yùn)輸

常溫運(yùn)輸及保存（其中蛋白酶 K 溶液需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存,。溶液 B 需要常溫運(yùn)

輸,，4℃保存），有效期一年,。

自備試劑

1.5 mL 塑料離心管,、β-巰基乙醇、氯仿,。

使用方法：

1.將 30-50 mg 左右指甲剪碎,，放入提前預(yù)冷至-70℃~-60℃的冷凍研磨儀中研磨成粉末，隨后將樣本轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5 mL 塑料離心管中,。

2.加入 1 mL 法醫(yī)指甲 DNA 提取溶液 A（使用之前需取本次實(shí)驗(yàn)所需的溶液 A 現(xiàn)加入自備的β-巰基乙醇,，β-巰基乙醇的終濃度為 5%）和 20 μL 蛋白酶K 溶液（10 mg/mL），37℃保溫 10 小時(shí)（一般過夜保溫就可以）,。注意：最好讓反應(yīng)體系處于搖晃狀態(tài),，此保溫長(zhǎng)度一般可以讓指甲溶化。

3.加入 0.3 mL 的法醫(yī)指甲 DNA 提取溶液 B 和 0.2 mL 的自備氯仿,，振蕩器上振蕩 30 秒充分混勻,。

4.12,000 rpm 室溫離心 3 分鐘，小心將上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 塑料離心管中,。

5.在上清液中加入等體積的法醫(yī)指甲 DNA 提取溶液 C,，上下顛倒 30 秒充分混勻。

6.將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,。每次是先將 0.7-0.8 mL 混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,，室溫放置 2 分鐘，12,000 rpm 室溫 1 分鐘,，棄穿透液,。再把剩余的一半上柱，重復(fù)此操作,。

7.將 0.7 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中,，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄穿透液,。

8.將 0.3 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中,，12,000 rpm 離心半分鐘（此步為第二次洗滌，一般可以省略）,。

9.空甩離心吸附柱半分鐘去除殘留液體,。

10.將離心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料離心管中，加入 30 μL DNA 洗脫液（基因組 DNA 專用）,。

11.12,000 rpm 離心 1 分鐘,，管底即為指甲 DNA 溶液,，可立即用于 PCR，也可長(zhǎng)

期保存在-20℃,。注意：由于指甲中 DNA 的含量十分少,，所以電泳檢測(cè)時(shí)即使全部上樣也只能看見十分微弱的 DNA 條帶。

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