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產(chǎn)品簡介：

由于土壤中有機質(zhì)含量豐富,，尤其是其中的腐殖酸對 RT-PCR 等后續(xù)反應有極大的抑制作用，所以從土壤微生物提取高純度的 RNA 一直是十分棘手的問題,。為解決此問題,，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：

1.去腐殖酸污染效果好,，RNA 純度更高,，平均 OD260/280 一般都在 2.0左右。

2.化學裂解結(jié)合玻璃珠機械裂解細胞,，可以有效裂解土壤中存在的大量有堅硬細胞壁的真菌和孢子,。

3.快捷,，處理一個樣品只需要約十幾分鐘。

4.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR,、Northern 雜交,、cDNA 合成等實驗。

5.性價比高于進口的土壤 RNA 提取產(chǎn)品,。

6.試劑無毒無害, 環(huán)保,。

7.可以進行無氯仿操作，只是純度稍微降低,，但不影響使用,。

8.本規(guī)格足夠 50 次微量提取，每次可以處理 0.3-0.5g 土壤樣本,。

9.土壤 RNA 純化試劑盒（過柱法）只能用于科研,。

產(chǎn)品參數(shù)：

規(guī)格及成分

保存和運輸

常溫運輸和保存,，有效期一年,。

自備試劑：

氯仿，RNase-free 收集管,。

使用方法：

1.稱取 0.3-0.5g 的土壤,，加入 1 mL 土壤 RNA 純化溶液 A 和 0.5g 玻璃珠， 震蕩器上劇烈震蕩 10 分鐘,。注意：一定要讓管底的土壤震蕩起來,。土壤RNA 純化溶液A 在低溫放置會產(chǎn)生沉淀，如果有沉淀,，請使用前放在 65℃ 水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后再取用,。

2.稍微靜置后將上清液轉(zhuǎn)移至一個干凈的 1.5mL 塑料離心管中,。

3.在離心管中加入 0.3 mL 的土壤 RNA 純化溶液 B 和 0.2mL 自備氯仿,，在振蕩器上振蕩 30 秒混勻。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來,。如果沒有自備氯仿,，則只加土壤 RNA 純化溶液 B 完成此步，然后取 1mL 到 1 個新得離心管中,，進入第 6 步,。

4.室溫 12000rpm 離心 5 分鐘。上層含有 RNA,，白膜下層為有機相,，中間層白膜（如果可見的話）含有 DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),，避免觸及或吸取,。

5.將離心所得上清液（約 0.6 mL）轉(zhuǎn)移到另一干凈的 1.5 mL 塑料離心管中,， 為避免觸及或吸取中間層白膜，最好留下 100μL 上清液不取,。

6.在上清液中加入 0.5 mL 的土壤 RNA 純化溶液 C,，蓋上蓋子后上下顛倒混勻，此時溶液呈白色渾濁狀,。

7.將一半的混合液（0.75mL）轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,，套入收集管中后 12000 rpm 室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液,。

8.將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,，套入收集管中后 12000 rpm室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液,。

9.加 0.5 mL 通用洗柱液,，套入收集管中后室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液,。

10.加 0.5mL 通用洗柱液,，套入收集管中后室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液,。此步可以省略,。

11.將離心吸附柱套入收集管中后室溫離心半分鐘，棄含穿透液的收集管,。

12.室溫 12000 g 離心 2 分鐘,，此步非常重要，否則通用洗柱液殘留的乙醇會影響 RNA 的使用,。

13.將離心吸附柱套入到一個自備的 RNase-free 收集管中,，加入 50 μL RNA 洗脫液，室溫放置 1-2 分鐘,。

14.12000 rpm 室溫離心半分鐘,，離心管中溶液即為 RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用,。

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