在哺乳動物細胞培養(yǎng)中,，選擇合適的培養(yǎng)基對于細胞的生長和功能維持至關重要,。DMEM 高糖培養(yǎng)基（含 10% 血清，1% 雙抗）以其全面的營養(yǎng)成分和即用型配方,，成為眾多細胞培養(yǎng)場景的理想選擇,。
DMEM 高糖培養(yǎng)基經過精心配制,，已包含 10% 胎牛血清和 1% 雙抗（青霉素 - 鏈霉素溶液），無需額外添加成分,，開瓶即可直接用于細胞培養(yǎng),。這種即用型設計大大簡化了實驗前的準備工作，減少了因配制培養(yǎng)基帶來的誤差和污染風險,，特別適合那些對時間敏感的實驗和需要快速啟動培養(yǎng)的場景,。
DMEM 培養(yǎng)基本身含有豐富的營養(yǎng)成分,，包括各種氨基酸,、維生素、礦物質和葡萄糖,。與 MEM 相比,，DMEM 增加了多種成分的用量，尤其是葡萄糖含量高于 4,500mg/L,，為細胞提供了充足的能源供應,。10% 胎牛血清的添加進一步豐富了培養(yǎng)基中的生長因子和細胞黏附因子，支持細胞的快速增殖和健康生長,。1% 雙抗成分則有效抑制細菌和真菌的生長,，降低培養(yǎng)過程中的污染風險。
DMEM 高糖培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細胞的培養(yǎng),，包括但不限于成纖維細胞、神經元細胞,、神經膠質細胞,、平滑肌細胞等原代細胞，以及常見的細胞系如 HeLa,、293,、Cos-7 和 PC-12 等。對于生長速度快,、粘附性低的細胞系,，如雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞,、DNA 轉染的轉化細胞等,，該培養(yǎng)基能夠提供理想的生長環(huán)境，促進細胞的旺盛生長和穩(wěn)定傳代,。
在生物制藥領域,，DMEM 高糖培養(yǎng)基被廣泛用于疫苗生產和重組蛋白表達。例如,，利用 CHO 細胞生產重組人促紅細胞生成素（EPO）和乙肝疫苗等,。其高糖配方為細胞的高密度培養(yǎng)和生產過程提供了充足的能源,，有助于提高產物的產量和質量。在基礎研究中,，該培養(yǎng)基為細胞的長期培養(yǎng),、基因轉染、藥物篩選等實驗提供了穩(wěn)定的培養(yǎng)平臺,。
DMEM 高糖培養(yǎng)基應保存在 4℃左右的低溫環(huán)境中，避免光照直射和溫度波動過大,。在使用前,，將培養(yǎng)基從冰箱中取出，使其恢復至室溫,，以確保細胞在接種時不會因溫度驟變而受到應激,。
細胞接種：根據(jù)細胞類型和實驗需求，將細胞以適當?shù)拿芏冉臃N到培養(yǎng)容器中,。對于貼壁細胞,，可以使用培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板,；對于懸浮細胞,，通常使用搖瓶或懸浮培養(yǎng)袋。
培養(yǎng)條件：將接種后的細胞放入細胞培養(yǎng)箱中,，設置溫度為 37℃,，濕度保持在 95% 以上，二氧化碳濃度為 5% 左右,。這些條件有助于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,，為細胞提供一個適宜的生長環(huán)境。
定期換液：根據(jù)細胞的生長速度和代謝需求,，定期更換培養(yǎng)基,，一般每 2 - 3 天更換一次。換液時,，吸出舊的培養(yǎng)基,，用適量的 PBS 或無菌生理鹽水輕輕沖洗細胞，再加入新鮮的 DMEM 高糖培養(yǎng)基,。
觀察與記錄：在細胞培養(yǎng)過程中,，定期使用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)和生長狀態(tài)，記錄細胞的生長曲線和分裂情況,。注意觀察細胞的貼壁情況,、細胞密度和細胞形態(tài)是否正常。
當細胞生長達到實驗要求的密度或狀態(tài)時，可以進行下一步實驗操作,。對于需要長期保存的細胞,，可以將細胞凍存于液氮中。凍存時,，使用含 10% DMSO 的凍存培養(yǎng)基,，將細胞懸浮液分裝到凍存管中,，放入程序降溫盒中逐步降溫,，最終保存于液氮罐中。
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