DNA Quick Ligation Kit

DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他

目錄號：42110

產(chǎn)品儲存：-20°C 保存,，避免反復(fù)凍融次數(shù)過多。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

制品說明：本試劑盒可在室溫(22°C) 10分鐘條件下,，迅速完成DNA 片段粘端或平端連接反應(yīng),。連接產(chǎn)物可直接轉(zhuǎn)化?？捎糜贒NA 片段克隆,，文庫構(gòu)建，TA克隆,，Linker連接等,。

特點：快速、簡單,、粘端平端均可以在10分鐘內(nèi)完成連接反應(yīng),。

操作步驟：

1.   反應(yīng)按以下體系進行：

一般最后加入T4 DNA Ligase,， 充分混勻,，可瞬間離心收集液體至管底。

2.   22°C連接10分鐘（一般可在PCR儀器完成）,。

通常推薦22°C連接5-10分鐘 ,，>3kb長片段連接可以延長至30分鐘。不推薦超過30分鐘,，超過可能降低轉(zhuǎn)化子數(shù)量,。

3.   冰上冷卻，然后直接轉(zhuǎn)化或貯存于-20°C

     如儲存于-20°C,，轉(zhuǎn)化前應(yīng)該置冰上重新溶解,，充分混勻后進行轉(zhuǎn)化。

說明：

1.   轉(zhuǎn)化前不要熱滅活T4 DNA ligase,，否則將降低轉(zhuǎn)化效率,。

2.   DNA片段體積大于4 ml的,，可增加2 xQuick Ligation Buffer，總反應(yīng)體積相應(yīng)可以增至20 ml,，這樣在連接體系中可加入更大體積的DNA片段,。

DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他