2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）  

2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量

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產品內容

保存條件

-20℃保存，有效期 24 個月,。使用前,，充分融解，輕柔顛倒混勻,，短期使用可放在4 ℃,，避免反復凍融。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準  

產品簡介

2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,，為2x 預混液,，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分，可減少操作步驟,，縮短加樣時間,，降低污染幾率。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶,，配合精心優(yōu)化的Buffer體系，有效抑制非特異性擴增,，可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量,，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結果，具有靈敏度高,、特異性強,、穩(wěn)定性好等特點。

本品不含參比染料ROX,，適用于不需要ROX校準的儀器,，常見的是Bio-rad系列、Roche,、國產qPCR儀,。Roche、國產qPCR儀,。

1. 將DNA模板,、引物、2 x SYBR qPCR Mix,、ddH2O溶解并置于冰上備用,。

2. 冰上配制qPCR反應體系：（以20μl反應體系為例）

注意：

1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系，cDNA原液≤總反應體系的10%，基因組DNA的量為10-100 ng,。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數不同,，可對模板進行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量,。

2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM,，就可以得到較好的結果，反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內進行調整,。擴增效率不高的情況下,，可提高引物濃度；發(fā)生非特異性反應時,，可降低引物濃度,，由此優(yōu)化反應體系。

1） 本產品兼容性強,，絕大多數情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果,。一般來說，二步法擴增特異性高,，三步法擴增效率高,。如果融鏈曲線較差，可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度,；如果因使用Tm值較低的引物等原因,，得不到良好的實驗結果時，可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增,。

2） 根據引物的Tm值進行退火&延伸（退火）溫度的設定,；

3） 延伸（退火&延伸）時間的設置還需要根據您所使用的qPCR儀所需要的最短數據采集時間自行調整。

4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定,。

2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量